外泌体表面蛋白怎么进行定量,比如CD63,怎么样对外泌体进行定量?
请教各位大神,大家知道怎样对外泌体表面蛋白进行定量吗?看有文献用Western,还有裂解外泌体后用BCA进行定量,请问裂解后的外泌体蛋白定量应该是外泌体全部蛋白的吧,应该不只是表面蛋白(CD63这种)吧,还有这个BCA是怎么操作呢?有没有很可靠地能表示外泌体表面蛋白的定量方法?另外,怎么根据外泌体表面蛋白的量来算出外泌体的量呢?还有外泌体文献报道的外泌体浓度为μg/ml,这种浓度是怎样测出来的呢?还有表示外泌体10^9/ml这个测外泌体个数的应该是通过NTA吧?求大神分享外泌体定量的方法?急急急~
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a大胖子 2017-12-05 10:04#2
非常感谢您的回复,谢谢!@chao_yw
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ohohoh_ 2018-03-13 08:19#3
楼主你好,请问定量的问题你解决了吗?BCA能不能反映外泌体的分泌量呢?还是外泌体的RNA浓度可以反映啊。
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小宇103 2018-03-13 19:02#4
我们都是裂解后通过BCA测总蛋白浓度,然后通过WB检测CD63等蛋白分子的。一般步骤:NTA检测浓度和大小分布,电镜检测形态,WB检测分子。
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tgedff 2018-03-15 17:19#5
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a大胖子 2018-03-15 19:35#6
@ohohoh_,您好!我还没有做这个定量的实验,目前实验有点问题,还没做到这一步,我只是先提前了解一下这个定量怎么确定,不过我还没操作。
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Katherine19 2018-03-16 09:27#7
NTA检测外泌体浓度哪个公司比较好呢?
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这是CD63的抗体综述,你也许可以看下那些用于wb的抗体,看看相应文献中的定量方法,点击第一列货号的话可以看到该抗体对应的所有sci文献:
https://www.labome.com/review/gene/human/CD63-antibody.html
在推荐一篇蛋白定量方面的综述吧,虽然不一定有用:
https://www.labome.com/method/Protein-Quantitation.html