【求助】新手求解DNA dot-blot问题 有图片。提前谢过啦!

楼主  收藏   举报   帖子创建时间:  2011-11-04 18:49 回复:8 关注量:159
各位大侠,我做的DNA dot-blot有问题,请各位帮忙指点

问题
1. 探针梯度稀释结果貌视正常,但所有1-10个待测样本从64倍稀释到32倍浓度时候,信号一下就没有了。
2. 样本点样呈水浸状,而不是较为均匀的斑点,如何改进。

多谢啦!
  • mpark 2011-11-04 23:04
    #1

    Try to spot the DNA samples in small volumes (less than 50 ul) on the membrane with the aid of a vacuum pump. Try to use some positive DNA and spot on the membrane with series dilutions as control in the hybridization.

  • uwijm 2011-11-05 16:04
    #2

    多谢帮助!
    我点样只有1ul啊,图片是放大的。可能是需要有机器点样可能效果比较好吧?

  • uwijm 2011-11-15 11:21
    #3

    多谢,已解决

  • shadow123doc 2015-07-02 10:58
    #4

    uwijm
    多谢,已解决
    你好,我近期也需要做DNA的dot blot,也是很纠结这个点样问题,不知道你最后是如何解决的?谢谢!

  • akinunu 2016-08-01 16:47
    #5

    uwijm
    多谢,已解决

    您好!请问是怎样解决的呢?我的也不是均一的点,而是圈状。虚心学习。谢谢!

  • akinunu 2016-08-01 17:18
    #6

    shadow123doc
    uwijm
    多谢,已解决
    你好,我近期也需要做DNA的dot blot,也是很纠结这个点样问题,不知道你最后是如何解决的?谢谢!

    您好!请问您的这个问题解决了吗?


  • shadow123doc 2016-08-01 23:14
    #7

    akinunu
    shadow123doc
    uwijm
    多谢,已解决
    你好,我近期也需要做DNA的dot blot,也是很纠结这个点样问题,不知道你最后是如何解决的?谢谢!

    您好!请问您的这个问题解决了吗?B

    BioRad 有专门的微量点样器,你可以试试。或者直接用小枪头点样,也是可以的。

  • liulianran 2018-03-16 16:47
    #8


    10楼

    同问楼主,我也是用基因组做抗原,然后是检测5-mc,但是看文献图的旁边都有一个亚甲蓝染色的图,不知道这个就是染亚甲蓝的那个也是将同样剂量的基因组点在NC膜上,然后染色吗,具体该怎么染色呢(亚甲蓝的浓度,染色时间啥的),还有染完之后如何看呢,还望博主指导