【第十届原创】实验室建设实例分享2--基因检测实验室

楼主  收藏   举报   帖子创建时间:  2019-01-22 17:24 回复:6 关注量:97
新建实验室分为基因检测实验室,基因检测实验室,常规理化实验室,金属元素实验室,仪器分析实验室等。限于篇幅,本文仅分享基因检测实验室建设相关内容。
1,基因检测实验室的布局设计:新建实验室面积为1200平米,基因检测实验室面积约100平米左右,空间布局设计是单向流通,依次为试剂准备室,样品制备室,基因扩增室,产物分析室。每个房间均有缓冲间,外有专用洁净走廊。设有样品暂存间,保证样品状态的延续性和稳定性,有利于检测结果的准确性。基因检测实验室布局设计如图1所示。

图1 基因检测实验室布局设计草图





人流通过专用洁净走廊和缓冲间进出各功能间,缓冲间门锁均为互锁结构,保证各室的环境和外界环境的隔离效果。
试剂从试剂准备室的缓冲窗口进入样品制备室,样品在样品制备室进行基因提取的操作,经过缓冲窗口进入基因扩增室进行基因扩增,荧光定量PCR产物可直接分析结果,普通PCR产物需要进入产物分析室进行产物分析。扩增分析后的废弃物即污流直接通过缓冲窗口进入危废灭菌间灭菌,按照医疗垃圾标准进行无害化处理。
各功能区的空气压力严格按照标准的PCR实验室建设方案来设计,基因扩增前室内为正压环境,基因扩增后室内为负压环境。实验室和缓冲间顶部装有紫外灯,供消毒用。
2,仪器设备,试剂耗材采购
基因检测实验室仪器设备和试剂耗材采购根据实验室拟开展项目来确定,本实验室主要开展项目为动物源性分析,转基因植物鉴定和微生物致病菌快速鉴定等。常规的主要设备见表1。

表1 基因检测实验室主要设备清单

设备名称

数量

作用

重要性

生物安全柜

2台

基因检测操作

主要设备

灭菌锅

两台100L

灭菌

主要设备

实时荧光定量PCR

1台

基因扩增及分析

主要设备

超净工作台

1台

基因检测超净环境(百级)

主要设备

普通PCR

2台

基因扩增

主要设备

多通道移液器

2套

电泳加样

主要设备

凝胶成像仪

 

基因产物分析

辅助设备

电泳仪电源

1套

凝胶电泳

辅助设备

电泳槽

1套

凝胶电泳

辅助设备

纯水机

一体机

基因检测检测用水

主要设备

超微量紫外分光光度计

 

壁挂式 消毒灭菌

主要设备

台式离心机

 

制样均质

辅助设备

冰箱冰柜冷藏展示柜

3台

样品保藏,试剂保藏,菌种保藏

辅助设备

移液枪

1mL,0.1mL,0.01mL各3支

基因检测检测

辅助设备

耐高压处理的离心管和加样器,吸头(带滤芯)

精密度0.2摄氏度

大肠杆菌,粪大肠菌群检测

辅助设备

天平

3台

配置培养基及称样用

辅助设备

金属浴

1台

加热用

辅助设备

万能粉碎机

3台

粉碎样品

辅助设备

液氮罐

一台

粉碎冷冻样品

辅助设备

陶瓷研钵

10套

研磨样品

辅助设备

3,实验室验收及仪器设备调试

基因检测实验室设计为全封闭空间,空间四周及上层均为彩钢板结构,填充物为阻燃材料,主体颜色为哑白色,门窗玻璃为普通玻璃,为防止沉积灰尘,窗料使用R25MM铝合金圆弧压线;所有二维连接处的内侧均使用R50MM铝合金内圆角,暴露在外的二维连接线的外侧则用R100MM铝合金外角连接;彩钢板的三维连接处使用三维接点过度,而彩钢板与墙角地面则用铝合金槽连接。吊顶材料亦为彩钢板,地面为环氧树脂材料,具有无缝隙、耐腐蚀、平整、容易清洗的特征。地面地脚线用阴角铝材装饰,美观且严密性好。整个实验室内应形成坚固、无缝、平滑、美观、不反光、不积尘、不生锈、防潮、抗菌、性能优良的无菌表面和内壳。基因检测实验室入口设置有门禁和实时摄像头,可有效控制非授权人员的进入。验收标准参考GB 50591-2010《洁净室施工及验收规范》, GB 50346-2011 《生物安全实验室建筑技术规范》 现场及部分仪器设备如图所示。

3,基因检测人员培训及拟开展项目开发

基因检测实验室拟开展项目如表2所示,按计划招聘分子生物学专业硕士,有相关工作经验优先,在总部基因检测实验室培训学习6个月,考核目标为全面掌握基因检测操作技能和标准操作程序,植物转基因分析和动物源性分析等。

表2 基因检测拟申请CMA资质项目表

项目名称

标准号

仪器试剂耗材是否满足要求

牛源性

《食品、化妆品和饲料中牛羊猪源性成分检测方法 实时PCR法 》 SN/T 2051-2008

羊源性

《食品、化妆品和饲料中牛羊猪源性成分检测方法 实时PCR法 》 SN/T 2051-2008

猪源性

《食品、化妆品和饲料中牛羊猪源性成分检测方法 实时PCR法 》 SN/T 2051-2008

驴源性

《食品及饲料中常见畜类品种的鉴定方法 第4部分:驴成分检测 实时荧光PCR法》 SN/T 3730.4-2013

马源性

《食品及饲料中常见畜类品种的鉴定方法 第5部分:马成分检测 实时荧光PCR法》 SN/T 3730.5-2013

狐狸源性

《食品及饲料中常见畜类品种的鉴定方法 第3部分:狐狸成分检测 实时荧光PCR法》 SN/T 3730.3-2013

鹿源性

《动物源性饲料中鹿源性成分定性检测方法 PCR方法》 GB/T 21106-2007

骆驼源性

《动物源性饲料中骆驼源性成分定性检测方法 PCR方法》 GB/T 21100-2007

貂源性

《食品及饲料中常见畜类品种的鉴定方法 第1部分:貂成分检测 实时荧光PCR法》 SN/T 3730.1-2013

兔源性

《动物源性饲料中兔源性成分定性检测方法 实时荧光PCR方法》 GB/T 21102-2007

狗源性

《动物源性饲料中狗源性成分定性检测方法 PCR方方法》 GB/T 21105-2007

猫源性

《食品及饲料中常见畜类品种的鉴定方法 第6部分:猫成分检测 实时荧光PCR法》 SN/T 3730.6-2013

鸡源性

《动物源性产品中鸡源性成分PCR检测方法》 SN/T 2978-2011

鸭源性

《食品及饲料中常见禽类品种的鉴定方法 第5部分:鸭成分检测 PCR法》 SN/T 3731.5-2013

鹅源性

《食品及饲料中常见禽类品种的鉴定方法 第2部分:鹅成分检测 PCR法》 SN/T 3731.2-2013

鹌鹑源性

《食品及饲料中常见禽类品种的鉴定方法 第1部分:鹌鹑成分检测 PCR法》 SN/T 3731.1-2013

火鸡源性

《食品及饲料中常见禽类品种的鉴定方法 第4部分:火鸡成分检测 实时荧光PCR法》 SN/T 3731.4-2013

鸽子源性

《食品及饲料中常见禽类品种的鉴定方法 第3部分:鸽子成分检测 实时荧光PCR法》 SN/T 3731.3-2013

虾源成分

《出口食品过敏原成分检测 第10部分:实时荧光PCR方法检测虾/蟹成分》 SN/T 1961.10-2013

蟹源成分

《出口食品过敏原成分检测 第10部分:实时荧光PCR方法检测虾/蟹成分》 SN/T 1961.10-2013

水稻转基因成分

《水稻及其产品中转基因成分 实时荧光PCR检测方法》 SN/T 2584-2010

转基因食品

《食品中转基因植物成分定性PCR检测方法》 SN/T 1202-2010

转基因产品

《转基因产品检测 核酸定性PCR检测方法》 GB/T 19495.4-2004

转基因大豆

《大豆中转基因成分的定性PCR检测方法》 SN/T 1195-2003

转基因小麦

《小麦中转基因成分PCR和实时荧光PCR定性检测方法》 SN/T 1943-2007

转基因玉米

《转基因成分检测 玉米检测方法》 SN/T 1196-2012

4总结

基因检测实验室建设,在设计建造过程中,主要关注点为室内空气污染控制和操作流程过程中的交叉污染控制,基因检测实验室有着及其特殊和非常严格的要求,可按照《基因检验实验室技术要求》国家质监检验总局SN/T 1193-2003进行设计和验收,硬件建好后,关注点主要是检测人员的专业素质和专业技能培训,试剂耗材的采购和标准方法的开发及技术经验的积累等,实验室人员的技术水平决定了基因检测的专业水平。

  • 牛牛0322 2017-08-31 15:23
    #1

    楼主您好,帖子中间出现乱码,请重新编辑一下

  • qianguiyun1 2017-08-31 09:41
    #2

    转基因是怎么回事?能不能科普一下?

  • zal 2017-09-04 21:17
    #3

    图文并茂,很不错。

  • kenichi 2017-09-05 13:45
    #4

    请问在分子检测实验室建设中是否有考虑在做外源性成分和转基因检测之外,也做食源性致病菌的分子检测呢?

  • yayicuo 2018-03-09 15:46
    #5

    图文并茂,很有借鉴意义。

  • 我是风儿 2018-03-10 16:43
    #6

    做基因检测的还不多,有前景