【求助】如何区分相近大小的条带 跪谢!

楼主  收藏   举报   帖子创建时间:  2015-10-23 21:52 回复:5 关注量:202
各位大神好!!!小弟最近遇到一个问题,我把融合的基因与T载相连,(融合基因2200bp左右)但在双酶切准备连接表达载体的时候,总出现问题,主要就是跑胶的时候不能将目的基因与T载分开,导致我根本不能将目的基因回收!!!请问有经验的大神,我该怎么办,用多少浓度的琼脂糖????还有电压多久?????多长时间能分开????跪谢!!!小弟明年就毕业了 ,还望各位鼎力相助!!!
  • mpark 2015-10-25 00:41
    #1

    How big the T vector is? Do you have any gel picture?

  • 菜花不止会踢球 2015-10-26 09:34
    #2

    T载用的pmd19-T 大概2700左右 ,我用的1%的胶跑了大概40分钟 还是分不开 感觉有分开的趋势 但是很模糊

  • mpark 2015-10-26 16:03
    #3

    Try to make a 1% long gel and load each well with 0.2-0.4 ug of digested plasmid for 10 wells or 15 wells. Run gel at 20 voltage and 30 mA at room temperature for 12-16 hours in 1 x TAE.

  • 菜花不止会踢球 2015-10-26 20:51
    #4

    Thank U! I'll try !

  • 没啥好聊 2018-03-16 19:17
    #5

    请问你区分开了没?如何区分?