BV2细胞如何培养状态才能好。。。?

楼主  收藏   举报   帖子创建时间:  2016-04-13 20:55 回复:35 关注量:235

前段时间养了BV2细胞,前两代状态很好,贴壁多,1:3传代的,但到了第三代状态就不太好了,悬浮很多,传至第四代就不行了,基本不贴壁了。现在买了新细胞,刚送到,放在培养箱中孵育了6h,镜下观察有大量悬浮,贴壁的也很多,请问这个状态可以吗?

  • drr1028 2016-10-26 09:32
    #1

    我也是刚养BV2没多久,一开始拿回来还是好好的,呈圆形或菱形,可是传代后细胞越长越多分支状,以为是血清的问题,换了血清还是不行,反复好几个月了,难道是**作问题还是培养方法(10%FBS+1%PS)问题,不知哪位大神能指点一下,万分感谢


  • hellen_zhang 2016-04-14 09:33
    #2

    这株细胞对胰酶特敏感,稍微消化过都不行。多试试,掌握消化时间吧。我记得好像10s不到的样子,不过这个条件不同也会有差异。具体情况具体掌握

  • 药yuing 2016-04-14 15:16
    #3

    我之前一直用的0.05%的胰酶,消化30s,难道是因为这个状态不行了?另外就是消化后,BV2离心对它的影响会不会很大?可不可以不消化直接吹下来呢?

  • 上海老猪 2016-04-14 15:22
    #4

    BV2细胞不用消化的,直接吹打细胞进行传代,本身细胞的铁壁就不是很理想的

  • 药yuing 2016-04-14 18:55
    #5

    这样。。可是买细胞的时候,单位说要消化= =

    另外,BV2冻存的话,一个小瓶(T25)冻一支,这个密度够吗?可以复一起来么?

  • 药yuing 2016-04-17 10:26
    #6

    hellen_zhang

    这株细胞对胰酶特敏感,稍微消化过都不行。多试试,掌握消化时间吧。我记得好像10s不到的样子,不过这个条件不同也会有差异。具体情况具体掌握

    BV2突然开始长得比较慢了,怎么办

  • hellen_zhang 2016-04-18 08:52
    #7

    药yuing
    hellen_zhang

    这株细胞对胰酶特敏感,稍微消化过都不行。多试试,掌握消化时间吧。我记得好像10s不到的样子,不过这个条件不同也会有差异。具体情况具体掌握

    BV2突然开始长得比较慢了,怎么办

    看什么原因了,如果是消化问题,还是建议直接复苏新的吧,省的浪费时间精力试剂

  • 药yuing 2016-04-20 21:01
    #8

    hellen_zhang
    药yuing
    hellen_zhang

    这株细胞对胰酶特敏感,稍微消化过都不行。多试试,掌握消化时间吧。我记得好像10s不到的样子,不过这个条件不同也会有差异。具体情况具体掌握

    BV2突然开始长得比较慢了,怎么办

    看什么原因了,如果是消化问题,还是建议直接复苏新的吧,省的浪费时间精力试剂

    细胞看着很多,离心下来很少,是什么原因,哭

  • hellen_zhang 2016-04-21 08:50
    #9

    没图片不好判断

  • 药yuing 2016-04-22 10:24
    #10

    hellen_zhang

    没图片不好判断

    找到原因了。。。。。离心机坏了= =