多重荧光免疫组化mIHC是一道七色光，CST中国助你让它变得更美妙

随着对肿瘤等疾病的深入认知，人们有越来越多的靶向药物可以选择，达到良好的疾病缓解效果。在临床病理和基础科研的工作中，需要对大量不同样本进行一系列靶蛋白和生物标志物免疫检测。免疫组织化学作为常规病理检测手段，是很多疾病检测的“金标准”，不仅能够辅助指导疾病分型，作为靶向用药的依据;而且因其能还原组织形态、找准靶点细胞亚定位信息，在临床前研究中也发挥着不可替代的作用。基于酪胺信号放大的荧光多重免疫组织化学法(mIHC) 是研究免疫肿瘤学的一种有价值的工具，能够在福尔马林固定、石蜡包埋的 (FFPE)组织样本中检测6种或更多种蛋白质/生物标志物。

CST赛信通关于免疫组化Death Receptor Signaling信号通路图

CST赛信通关于免疫组化Energy Metabolism信号通路图

作为一家专注于信号转导领域的公司，CST中国一直站在转化医学研究的前沿，全力为广大研究者提供创新型的解决方案及试剂，让CST中国的专家告诉你：做多重荧光简单，有种多快好省的方法。

这种方法就是TSA技术

(Tyramide Signal Amplification™，酪胺信号放大技术)：简单来说，用这种方法做多重免疫荧光是利用二抗上带有的HRP(而不是直接偶联荧光素)，来催化后续添加入体系的非活性荧光素。荧光素在HRP和过氧化氢的作用下被活化，跟临近蛋白的酪氨酸残基共价偶联，使得蛋白样品与荧光素稳定结合。然后微波处理，前一轮非共价结合的抗体被洗掉，共价结合的荧光素还留存在样品上。再换个一抗来第二轮孵育，周而复始。等到所有抗体孵育结束，荧光素都结合好后，最后去检测结果。

由于每次体系中都只有单一抗体孵育，因此无需担心抗体交叉反应，以及一抗二抗种属匹配问题，大大减少了实验设计时不同种属抗体选择匹配的限制。也就是说，如果用TSA技术，同一张片子上所有的靶标都可以选用特异性高的兔单克隆抗体。搭配同一支抗兔的HRP二抗就可以进行实验，而且信号放大的倍数大大增强。

荧光法多重免疫组化，可同时进行五个颜色通道以上，这种情况下发射光谱会重叠，我们可以借助多光谱成像系统来解决这个问题。这是传统间接荧光法染色和显色法多重免疫组化所随着对肿瘤等疾病的深入认知，人们有越来越多的靶向药物可以选择，达到良好的疾病缓解效果。在临床病理和基础科研的工作中，需要对大量不同样本进行一系列靶蛋白和生物标志物免疫检测。免疫组织化学作为常规病理检测手段，是很多疾病检测的“金标准”，不仅能够辅助指导疾病分型，作为靶向用药的依据;而且因其能还原组织形态、找准靶点细胞亚定位信息，在临床前研究中也发挥着不可替代的作用。基于酪胺信号放大的荧光多重免疫组织化学法(mIHC) 是研究免疫肿瘤学的一种有价值的工具，能够在福尔马林固定、石蜡包埋的 (FFPE)组织样本中检测6种或更多种蛋白质/生物标志物。

CST赛信通关于免疫组化Death Receptor Signaling信号通路图

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作为一家专注于信号转导领域的公司，CST中国一直站在转化医学研究的前沿，全力为广大研究者提供创新型的解决方案及试剂，让CST中国的专家告诉你：做多重荧光简单，有种多快好省的方法。

这种方法就是TSA技术

(Tyramide Signal Amplification™，酪胺信号放大技术)：简单来说，用这种方法做多重免疫荧光是利用二抗上带有的HRP(而不是直接偶联荧光素)，来催化后续添加入体系的非活性荧光素。荧光素在HRP和过氧化氢的作用下被活化，跟临近蛋白的酪氨酸残基共价偶联，使得蛋白样品与荧光素稳定结合。然后微波处理，前一轮非共价结合的抗体被洗掉，共价结合的荧光素还留存在样品上。再换个一抗来第二轮孵育，周而复始。等到所有抗体孵育结束，荧光素都结合好后，最后去检测结果。

由于每次体系中都只有单一抗体孵育，因此无需担心抗体交叉反应，以及一抗二抗种属匹配问题，大大减少了实验设计时不同种属抗体选择匹配的限制。也就是说，如果用TSA技术，同一张片子上所有的靶标都可以选用特异性高的兔单克隆抗体。搭配同一支抗兔的HRP二抗就可以进行实验，而且信号放大的倍数大大增强。

荧光法多重免疫组化，可同时进行五个颜色通道以上，这种情况下发射光谱会重叠，我们可以借助多光谱成像系统来解决这个问题。这是传统间接荧光法染色和显色法多重免疫组化所