主要研究H3K4 H3K9 H3K27等等一些组蛋白甲基化的变化情况，跑WB的时候用Histone 3 当内参，但是一直跑不齐。我用的酸提取法提取的Histone，最后用的ddH2O溶解的组蛋白。因为听说BCA试剂盒不能用来测组蛋白H3的浓度而且看ABCAM的protocol说的用Bradford法，所以目前用的Bradford （考马斯亮蓝）法，用的BSA作的标准品方法（自己配的考马斯亮蓝和标准品），595测量的OD值，标准曲线Result 0.97....没有BCA试剂盒做出来的标曲（一般都0.997+）那么好。这样定量出来内参一直跑不齐，想问一下是因为我自配的考马斯亮蓝和BSA标准品有问题？还是这个方法有问题？你们有什么好的总组蛋白H3的定量方法吗？（除了试剂盒就没办法了吗，我看总组蛋白H3的定量试剂盒好像3000+挺贵的。）

万分感谢。

主要研究H3K4 H3K9 H3K27等等一些组蛋白甲基化的变化情况，跑WB的时候用Histone 3 当内参，但是一直跑不齐。我用的酸提取法提取的Histone，最后用的ddH2O溶解的组蛋白。因为听说BCA试剂盒不能用来测组蛋白H3的浓度而且看ABCAM的protocol说的用Bradford法，所以目前用的Bradford （考马斯亮蓝）法，用的BSA作的标准品方法（自己配的考马斯亮蓝和标准品），595测量的OD值，标准曲线Result 0.97....没有BCA试剂盒做出来的标曲（一般都0.997+）那么好。这样定量出来内参一直跑不齐，想问一下是因为我自配的考马斯亮蓝和BSA标准品有问题？还是这个方法有问题？你们有什么好的总组蛋白H3的定量方法吗？（除了试剂盒就没办法了吗，我看总组蛋白H3的定量试剂盒好像3000+挺贵的。）

万分感谢。

对条带进行灰度分析 然后根据灰度分析的结果微调上样量。