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静镆 2017-05-10 10:47#2
Ryuboon
mix说明书上对各种模板都有量的要求,但是以cDNA为模板只是说不超过体积的十分之一,但是每个人提的cDNA浓度不一样,最后用的量也会有差异吧,很疑惑有没有大神解答一下小白的问题
我一般反转录模板量1ug mRNA,反转录以后荧光定量稀释5倍,10ul体系用2ul稀释液 -
Ryuboon 2017-05-10 11:05#3
静镆
我一般反转录模板量1ug mRNA,反转录以后荧光定量稀释5倍,10ul体系用2ul稀释液翻转录后不用测一下cDNA浓度来确定加多少量吗?你这样是加了400左右?
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Ryuboon 2017-05-10 11:05#4
翻转录后不用测一下cDNA浓度来确定加多少量吗?你这样是加了400左右?
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Ryuboon 2017-05-10 11:06#5
静镆
我一般反转录模板量1ug mRNA,反转录以后荧光定量稀释5倍,10ul体系用2ul稀释液翻转录后不用测一下cDNA浓度来确定加多少量吗?你这样是加了400左右?
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静镆 2017-05-10 16:18#6
Ryuboon
翻转录后不用测一下cDNA浓度来确定加多少量吗?你这样是加了400左右?
差不多,我一般还是会测一下,但是,cDNA的浓度跟mRNA的模板浓度基本是一致的,加1ug的话最后差不多就是1ug/ul,你也可以测一下 -
5945笑笑 2017-11-18 09:53#7
静镆
差不多,我一般还是会测一下,但是,cDNA的浓度跟mRNA的模板浓度基本是一致的,加1ug的话最后差不多就是1ug/ul,你也可以测一下请问我最近PCR效果不太好也测了一下,1ugmRNA,20ul逆转体系测出DNA是2000ng/ul
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静镆 2017-11-21 08:25#8
5945笑笑
请问我最近PCR效果不太好也测了一下,1ugmRNA,20ul逆转体系测出DNA是2000ng/ul
建议跑个电泳看一下RNA质量 -
5945笑笑 2017-11-21 11:16#9
静镆
建议跑个电泳看一下RNA质量好的,谢谢你。
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zx19940201 2018-03-15 16:01#10
5945笑笑
请问我最近PCR效果不太好也测了一下,1ugmRNA,20ul逆转体系测出DNA是2000ng/ul
请问1ugRNA是多少ul
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