数字PCR技术讨论
目前各家仪器公司推出自己的数字PCR,目前市场主流的是三家,1、LIFE Technologies 3D数字PCR(芯片式数字PCR):我个人认为是微孔数字PCR,主要是将20ul反应体系分散到20000个微孔中进行反应,变成20000个反应体系,PCR反应结束后,采用CCD拍照,数阳性反应孔。2、Bio-Rad的微滴数字PCR(油包水原理):将20ul反应体系采用液滴反应器形成20000个油包水反应体系,PCR反应结束后,才有流式细胞术的原理,检测每一个液体,数阳性反应的液滴数量。3、RainDance 的数字PCR(油包水原理)、原理与伯乐微滴数字PCR相同,但是其液体形成能力比伯乐强很多,理论上可以产生1000万个小油滴。价格从高到底:Raindance、Bio-Rad、LIFE Technologies。目前本人使用的是Bio-Rad QX200、正在做实验室,希望广数字PCR的使用者可以相互交流,相互解答疑问,更好的利用数字PCR。
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zhangliyeziliz 2016-07-26 16:24#2
找到组织了,探针怎么设计 ,有相关的文献吗
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大苏打呀呀 2016-07-26 20:41#3
哇,还有这种高大上的PCR
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wjf7862203 2016-08-01 23:07#4
zhangliyeziliz
找到组织了,探针怎么设计 ,有相关的文献吗
探针和荧光PCR一样的要求一样设计 -
wjf7862203 2016-08-01 23:08#5
Garfield31
你好,我也是做QX200,找到组织啦
可以相互交流 -
edisonplb 2016-08-12 13:06#6
我做QX100,最近跑的结果那些点比较弥散,就像下雨一样,楼主遇到过这种情况吗?
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心灵茶坊 2016-08-26 07:13#7
Garfield31
你好,我也是做QX200,找到组织啦
我也准备做呢,也想知道引探怎么设计,做SNP的 -
心灵茶坊 2016-08-26 07:15#8
edisonplb
我做QX100,最近跑的结果那些点比较弥散,就像下雨一样,楼主遇到过这种情况吗?
是用的质粒吗,如果是质粒的话,这样很正常,如果不是的话,可以调一下退火温度 -
cypzyf 2016-08-31 02:05#9
心灵茶坊
edisonplb
我做QX100,最近跑的结果那些点比较弥散,就像下雨一样,楼主遇到过这种情况吗?
是用的质粒吗,如果是质粒的话,这样很正常,如果不是的话,可以调一下退火温度质粒可以尝试做一下酶切,具体操作可参考试剂说明书。
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wjf7862203 2016-09-16 15:13#10
大伯乐数字PCR,大家一般用什么探针,我最近用FAM/TAMRA,做不出啦
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你好,我也是做QX200,找到组织啦