数字PCR技术讨论

楼主  收藏   举报   帖子创建时间:  2016-07-15 10:37 回复:34 关注量:454

目前各家仪器公司推出自己的数字PCR,目前市场主流的是三家,1、LIFE Technologies 3D数字PCR(芯片式数字PCR):我个人认为是微孔数字PCR,主要是将20ul反应体系分散到20000个微孔中进行反应,变成20000个反应体系,PCR反应结束后,采用CCD拍照,数阳性反应孔。2、Bio-Rad的微滴数字PCR(油包水原理):将20ul反应体系采用液滴反应器形成20000个油包水反应体系,PCR反应结束后,才有流式细胞术的原理,检测每一个液体,数阳性反应的液滴数量。3、RainDance 的数字PCR(油包水原理)、原理与伯乐微滴数字PCR相同,但是其液体形成能力比伯乐强很多,理论上可以产生1000万个小油滴。价格从高到底:Raindance、Bio-Rad、LIFE Technologies。目前本人使用的是Bio-Rad QX200、正在做实验室,希望广数字PCR的使用者可以相互交流,相互解答疑问,更好的利用数字PCR。

  • Garfield31 2016-07-19 16:19
    #1

    你好,我也是做QX200,找到组织啦

  • zhangliyeziliz 2016-07-26 16:24
    #2

    找到组织了,探针怎么设计 ,有相关的文献吗

  • 大苏打呀呀 2016-07-26 20:41
    #3

    哇,还有这种高大上的PCR

  • wjf7862203 2016-08-01 23:07
    #4

    zhangliyeziliz

    找到组织了,探针怎么设计 ,有相关的文献吗


    探针和荧光PCR一样的要求一样设计

  • wjf7862203 2016-08-01 23:08
    #5

    Garfield31

    你好,我也是做QX200,找到组织啦


    可以相互交流

  • edisonplb 2016-08-12 13:06
    #6

    我做QX100,最近跑的结果那些点比较弥散,就像下雨一样,楼主遇到过这种情况吗?

  • 心灵茶坊 2016-08-26 07:13
    #7

    Garfield31

    你好,我也是做QX200,找到组织啦


    我也准备做呢,也想知道引探怎么设计,做SNP的

  • 心灵茶坊 2016-08-26 07:15
    #8

    edisonplb

    我做QX100,最近跑的结果那些点比较弥散,就像下雨一样,楼主遇到过这种情况吗?


    是用的质粒吗,如果是质粒的话,这样很正常,如果不是的话,可以调一下退火温度

  • cypzyf 2016-08-31 02:05
    #9

    心灵茶坊
    edisonplb

    我做QX100,最近跑的结果那些点比较弥散,就像下雨一样,楼主遇到过这种情况吗?


    是用的质粒吗,如果是质粒的话,这样很正常,如果不是的话,可以调一下退火温度

    质粒可以尝试做一下酶切,具体操作可参考试剂说明书。

  • wjf7862203 2016-09-16 15:13
    #10

    大伯乐数字PCR,大家一般用什么探针,我最近用FAM/TAMRA,做不出啦