货号: | GBY-1 |
供应商: | 北京金博益生物技术有限公司 |
数量: | 500 |
保质期: | 2年 |
保存条件: | 室温 |
Genecolour TM核酸染料
浓度:10000×in DMSO
货号:GBY-2
保存:常温
特点:
● 无毒性:Genecolour独特的油性和大分子量特点使其不能穿透细胞膜进入细胞内,艾姆斯氏试验结果也表明,该染料的诱变性远远小于EB。
● 灵敏度高:适用于各种大小片段的电泳染色,对核酸迁移的影响小于SYBR Green I。
● 稳定性高: 适用于使用微波或其它加热方法制备琼脂糖凝胶;室温下在酸或碱缓冲液中极其稳定,耐光性强。
● 信噪比高:样品荧光信号强,背景信号低。
● 操作简单:与 EB 一样,在预制胶和电泳过程中染料不降解;而电泳后染色过程也只需30 分钟且无需脱色或冲洗 ,即可直接用紫外凝胶透射仪观察。
● 适用范围广:可选择电泳前染色(胶染法)或电泳后染色(泡染法);适用于琼脂糖凝胶或聚丙烯酰胺凝胶电泳;可用于 dsDNA、ssDNA 或 RNA 染色。
● 与EB有相同的光谱特性,无需改变滤光片及观察装置:标准的 EB 滤光片或 SYBR 滤光片都适用,使用与观察EB相同的普通紫外凝胶透射仪观察即可,在 300nm 紫外光附近可得到最佳激发。它和SYBR Green I的光谱相似,灵敏度相当,但更加稳定。
GenecolourTM是本公司开发的新型核酸染料,具有安全、灵敏等突出特点,可以作为各种核酸电泳的染色剂。与高致癌性的EB不同,GenecolourTM属于聚次甲基青类染料,毒性很低,使用安全。另外,GenecolourTM检测核酸的灵敏度比EB染色法平均高10倍左右。
与核酸结合的GenecolourTM染料的最大吸收峰为495nm,另外,在紫外区300nm——380nm还有一个吸收峰。染料发射绿光荧光,最大发射波长为515nm。可以用Generadar系列可见光凝胶透射仪观测。也可用紫外凝胶透射仪观测,效果稍差,但灵敏度等仍好于EB。
一.使用方法:
方法一:用含染料的凝胶进行电泳染色法
1. 制胶: 按常规操作,制备琼脂糖凝胶,凝胶熔化后,加入10000×GenecolourTM染料,使染料在凝胶中的终浓度为1×,(即如果制备50ml凝胶,加入染料5ul)。轻轻摇匀,倒胶。
2. 电泳、观测:按常规方法电泳,观测。
提示:对于1KB以上的Marker建议20000×GenecolourTM减少一半用量。如果条带有拖尾现象,也请减半用量。
方法二:电泳后染方法:
1. 按照常规方法进行电泳。
2. 用PH 7.0 — 8.5 的缓冲液(如:TAE,TBE 或 TE),按照30000:1的比例稀释GenecolourTM染料浓缩液,混匀,制成染色溶液,。
3. 将染色溶液倒入合适的聚丙烯容器中,放入凝胶,用铝箔等盖住容器使染料避光。室温振荡染色10—45分钟,染色时间因凝胶浓度和厚度而定。凝胶越厚、浓度越高,所需染色时间越长。对于聚丙烯酰胺凝胶,可以直接在玻璃平皿上染色(玻璃平皿必须预先经过硅烷化溶液处理,避免染料吸附在玻璃表面上)。将配好的工作溶液轻轻地倒在胶板上,让工作液均匀地覆盖整个胶板,并染色10—30分钟。
4. 观测。
提示:本方法适合于各种凝胶分析。
二.其它说明:
1. 该染料为聚次甲基青类染料,没有致癌性。
2. 在常规用酒精沉淀核酸的过程中,GenecolourTM可以全部从双链核酸上去掉。
3. 加入染料的凝胶可反复熔化使用,但会使检测灵敏度下降。
4. GenecolourTM对玻璃和非聚丙烯材料具有一定亲合力。建议在稀释、贮存、染色等使用过程中用聚丙烯类容器。
5. 储存:储存于室温,避光,有效期至少一年。
6. 本品仅供科研使用。
三.附录:GenecolourTM染料特点:
1. 灵敏:检测核酸的灵敏度,平均高于EB染色法10倍左右。
2. 经济:价格相当于进口同类产品1/5—1/10。
3. 操作简单:本染料有多种使用方法,操作简单。
4. 适用范围广:可适用于多种电泳分析。
5. 兼容性:对分子生物学中常用的酶(如:Taq 酶、内切酶、T4连接酶等)没有抑制作用。
温馨提示:不可用于临床治疗。