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份 库存999份
| 货号： | TD436-50 |
| 供应商： | 天漠科技 |
| 英文名： | TIANMO BIOTECH |
| 保质期： | 1年 |
| 保存条件： | 室温 |
| 规格： | 50次 |
快速质粒DNA小量提取试剂盒
Catalog No. TD436-50 (50次反应) TD436-100 (100次反应)
TD436-200 (400次反应)
Highlights
- 无需沉淀菌液，直接从培养菌液中提取质粒DNA。
- 独有的显色反应，可以直接观察到细胞裂解中和的程度，极大方便操作者判断其状态。
| 试剂盒组成 | 保存 | 50次 | 100次 | 400次 |
| 质粒DNA裂解液（蓝色） | 室温 | 6ml | 12ml | 48ml |
| 质粒DNA中和液（黄色） | 室温 | 20 ml | 40 ml | 160 ml |
| 质粒DNA预洗液 | 室温 | 15 ml | 30 ml | 120 ml |
| 质粒DNA洗涤液 | 室温 | 10 ml 15 ml 25 ml 第一次使用前按说明加指定量乙醇 | ||
| 质粒DNA洗脱液 | 室温 | 10ml | 20ml | 30ml |
| 2号柱 | 室温 | 50个 | 100个 | 400个 |
| 收集管（2ml） | 室温 | 50个 | 100个 | 400个 |
Note –售出后一年内产品质量是可以保证。 试剂已经过大量的常规检测来保证其可操作性。此产品仅供研究并且需要由专业人员来使用。
试剂盒中的部分试剂是有刺激性的。 请带好手套和防护眼镜。
注意事项:
- 环境温度低时溶液质粒DNA裂解液中SDS可能会析出沉淀，可在37℃水浴加热几分钟，即可恢复澄清，不要剧烈摇晃，以免形成过量的泡沫。
- 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、pH值变化，各溶液使用后应及时盖紧盖子。
- RNase A 已经添加到质粒DNA中和液中，请将中和液放置在4-10°保存 ，RNase A的终浓度为200ug/ml
- 溶液质量DNA中和液含有刺激性化合物，操作时要戴乳胶手套，避免沾染皮肤、眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时，要用大量清水或者生理盐水冲洗。
特性:
- DNA 纯度: 获得的质粒产量高、纯度好， 可以直接用于酶切、转化、PCR、体外转录、测序等
- 。一般情况Abs260/280 ≥ 1.8 。
- 质粒DNA产量: 每次可提取到约 25 µg ，主要依据质粒的拷贝数，培养物的成长环境等因素。
- 质粒DNA大小: 最高可达25 kb。
- 洗脱体积: ≥ 30 µl。
- 操作温度: 室温 (15-30°C)。
溶液制备:（使用之前需要配制）
. 10次反应的 质粒DNA洗涤液 已经添加乙醇无需添加。
50次反应的 质粒DNA洗涤液 应添加24 ml 100%的乙醇到6ml的质粒DNA洗涤液中。
100次反应的 质粒DNA洗涤液 应添加48 ml 100%的乙醇到12ml的质粒DNA洗涤液中。
200次反应的 质粒DNA洗涤液 应添加192ml 100%的乙醇到48ml的质粒DNA洗涤液中。
加入后请及时在方框打钩标记，以免多次加入!
操作步骤:
以下操作步骤均在室温下操作。乙醇已经添加到质粒DNA洗涤液中。
质粒DNA中和液使用前需要放置到4-10°预冷。
- 取600μl过夜培养的菌液直接添加到1.5ml离心管中。（最多可以处理3ml菌液，a.加入1.5ml菌液最大速度离心30秒， b.重复步骤a , c.添加600μlTE重悬沉淀）
- 添加100μl的质粒DNA裂解液到同一个1.5ml离心管中，温和地颠倒离心管数次使菌体充分裂解直到溶液完全变成蓝色。（操作此步时间一定要短并且避免剧烈震荡）
- 添加350μl预冷的质粒DNA中和液到上述离心管中，立即温和地上下翻转数次，中和完全后会出现黄色絮状沉淀（反复颠倒数次确保中和完全，中和完全后溶液呈黄色）
- 将上述1.5ml离心管放入离心机中，11,000 – 16,000 x g离心5分钟。
- 将上一步所得上清（~900μl）加入2号柱（柱套在收集管内）， 11,000 – 16,000 x g离心1分钟，倒掉收集管中的废液。
- 加入200μl质粒DNA预洗液，11,000 – 16,000 x g离心1分钟，无需倒掉废液。
- 加入400μl质粒DNA洗涤液（请先检查是否已加入无水乙醇!），11,000 – 16,000 x g离心1分钟，弃掉废液。
- 将收集管中的废液倒掉，并将2号柱套回收集管中，在11,000 – 16,000 x g下额外离心2分钟，尽量除去洗涤液， 以免洗涤液中残留乙醇抑制下游反应。
- 取出2号柱，放入一个干净的离心管中，在吸附膜的中间部位加30μl质粒DNA洗脱液。（洗脱液事先在 65-70℃水浴中预热，洗脱效果更好），室温放置2分钟，11,000 – 16,000 x g离心1分钟来洗脱质粒DNA。
温馨提示：不可用于临床治疗。
通过朝阳分局认证 
