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血管生成(Angiogenesis)功能学实验
实验原理:
血管生成(Angiogenesis)是指在已存在的毛细血管和微小动、静脉血管的基础上,以出芽的方式生成新血管的过程。体内血管生成是一个极其复杂的过程,一般包括血管内皮基质降解、内皮细胞移行、内皮细胞增殖、内皮细胞管道化分支形成血管环和形成新的基底膜等步骤。因此血管内皮细胞增值、迁移以及小管样结构形成实验成为检测血管生成功能的三个经典实验方法。
实验方法:
1.血管内皮细胞增值实验 (Cell Proliferation Assay)
1)采用原代的血管内皮细胞并进行常规的分离、鉴定、培养及传代;
2)利用MTS法进行细胞数量的分析和结果检测;
实验结果图示:
2.血管内皮细胞迁移实验 (Cell Migration Assay)
1)采用原代的血管内皮细胞并进行常规的分离、鉴定、培养及传代;
2)利用Transwell法进行细胞迁移实验;
2)利用Transwell法进行细胞迁移实验;
3)利用细胞荧光标记进行迁移细胞数量的计算和及结果分析;
实验结果图示:
3.血管内皮细胞小管样结构形成实验 (Tube formation Assay)
1)采用原代的血管内皮细胞并进行常规的分离、鉴定、培养及传代;
2)利用MatreGel进行细胞小管样结构形成实验;
3)利用两种不同的方法对小管数量进行定量分析及计算;
实验结果图示: