2×HieffTM HotStart PCR Master Mix (With Dye)

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更新: 2020-06-24
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UNICONTM HotStart PCR Master Mix (With Dye)

产品信息

产品名称

产品编号

规格

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价格(元)

2×UNICONTM HotStart PCR Master Mix (With Dye)

10111ES03

1 mL

-20℃

96.00

2×UNICONTM HotStart PCR Master Mix (With Dye)

10111ES08

5×1 mL

-20℃

432.00

产品描述

2×UNICONTMHotStart PCR Master Mix (With Dye)是即用型的PCR预混合溶液,含有UNICONTM HotStart Taq DNA PolymerasedNTP以及优化的缓冲体系,只需加入引物和模板即可进行扩增,大大简化了实验的操作步骤,提高了高通量操作和实验结果的重现性。UNICONTM HotStartTaq DNA PolymeraseUNICONTM Taq抗体和HieffTM TaqDNA Polymerase的混合产品。UNICONTM Taq抗体与HieffTM Taq DNA Polymerase具有很高的亲和力,高温50℃处理30min,依旧可以封闭HieffTM Taq DNA Polymerase的活性。UNICONTM HotStart Taq DNA Polymerase预变性温度下加热30 sec完全失活,释放出DNA聚合酶活性。使用该热启动taq酶可以有效抑制引物非特异性退火导致的扩增。

预混液中已加入电泳缓冲液和染料,使得PCR产物可以直接进行电泳,染料的存在不会干扰扩增效率。PCR产物具有3’-dA突出端,可轻松克隆至T载体。

产品应用

低拷贝基因扩增、基因型鉴定、菌落PCR

质量控制

核酸外切酶残留检测:20 μL本品和0.6 μg λDNA -HindIII37℃下孵育4hDNA的电泳谱带无变化。

核酸内切酶残留检测:20 μL本品和1μg λDNA37℃温育4 hDNA的电泳谱带无变化。

大肠杆菌残留DNA检测:50 μL体系中,加入25 μL本品,以无菌ddH2O为模板,扩增E.coil16s rDNA 基因。30个循环后扩增产物进行1% 琼脂糖凝胶电泳,EB染色,无扩增条带。

运输与保存方法

冰袋运输。-20 ºC保存。

注意事项

为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

 

PCR反应体系(50 μL

组分

体积

终浓度

ddH2O

to 50 μL

-

模板DNA

适量

-

引物正向(10 μM)

2 μL

0.4 μM

引物反向(10 μM)

2 μL

0.4 μM

2×UNICONTM HotStart PCR Master Mix(With Dye)

25 μL

1×

【注】:针对不同模板的最佳反应浓度有所不同,下表为50 μL反应体系推荐模板使用量,仅供参考。

模板种类

模板使用量

基因组DNA

50 ng-200 ng

质粒DNA

100 pg-20 ng

cDNA

1-5 μL (不超过反应体系的1/10)

PCR扩增程序

循环步骤

温度

时间

循环数

预变性

95℃

5 min

1

变性

95

30 sec

35

退火

50-60

30 sec

延伸

72

30 sec/kb

终延伸

72

10 min

1

【注】:1) 退火温度和时间:温度推荐使用50-60℃。退火温度过低会导致非特异性扩增。引物设计参考荧光定量引物标准。推荐退火时间设置为30 sec,可以在10-30sec内调节。退火时间太长可能导致扩增产物在胶上呈弥散状。也可根据需要,设立温度梯度去摸索引物退火的最适温度和时间。

2)延伸温度和时间:温度推荐使用72℃。时间推荐使用30sec/kb

3) 扩增产物:请将PCR扩增产物放置于-20℃保存,防止DNA发生降解。

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产品名称

产品货号

规格

价格()

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100×100 g

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