- 简易:仅需一步沉淀操作,离心时间仅需30min;
- 便捷:无需超高速离心机;
- 高效:相较传统提取方法有更高的产量;
- 全套解决方案:
配套本公司small RNA建库试剂盒(Vazyme #NR801),可对miRNA进行高通量建库测序,全面解析外泌体的奥秘;
配套本公司miRNA提取试剂盒(Vazyme #RC201)、miRNA RT-qPCR试剂(Vazyme #MR101/MQ101)可对外泌体中miRNA进行精确定量;
- 样本起始量低:起始样本的量可低至1 ml;
- 稳定性好:37℃放置一周未见提取效率下降。
外泌体粒径检测:
对6 ml传代培养48 h的HeLa细胞培养液上清提取外泌体,采用NTA (Nanoparticle Tracking Analysis,NanoSight,Malvern Instruments Ltd)对粒径大小进行分析,发现主峰粒径落在30-150nm之间,峰型分布好、产量高。
qPCR检测:
使用本公司产品与L公司同类产品对6 ml传代培养48 h的HeLa细胞培养液上清提取外泌体,并用所得外泌体进行miRNA提取,使用茎环法对两种miRNA进行miRNA qPCR定量检测。结果显示使用两种外泌体提取试剂所得的miRNA总量相当,两种miRNA扩增曲线显示出高度的一致性。(图中绿色和黄绿色代表本公司提取试剂;蓝色和红色代表L公司同类产品)。
高通量测序应用:
对6 ml传代培养48 h的HeLa细胞培养液上清提取外泌体,配套本公司miRNA提取试剂盒(Vazyme #RC201)和small RNA建库试剂盒(Vazyme #NR801)对所提取的外泌体小RNA进行高通量测序。数据显示提取所得外泌体中小RNA完整度高、复杂度高、覆盖度高,其中miRNA所占比例高,可用于外泌体RNA的高通量分析及novel RNA的发现。
本产品是专门用于分离提取细胞培养液上清样本中外泌体的试剂,只需通过简单的较低速度离心即可从样本中分离出大量外泌体。与传统的超高速离心相比,样本中的外泌体所受到的压力较小,可以保持较完整的形态;同时提取过程所需要的时间更短、所需要的样本起始量更低、提取效率更高。使用本产品获得的外泌体可以进行qPCR、高通量测序、细胞共培养等下游研究。