胰蛋白酶-EDTA溶液(0.25%)

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更新: 2021-05-27
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                                                     胰蛋白酶-EDTA溶液(0.25%:0.02%)

产品简介:

胰蛋白酶(Trypsin)是由胰脏产生没有活性的胰蛋白酶原分泌到小肠后,小肠内的肠肽酶会活化该酶原,形成胰蛋白酶。胰蛋白酶的特点在于已经活化的胰蛋白酶,能够继续活化更多胰蛋白酶原,这种过程即自动催化。胰蛋白酶在小肠工作,它会将蛋白质水解为肽,进而分解为氨基酸,其最适温度约为37℃。

  Leagene Trypsin-EDTA solution主要由0.25%胰酶、0.02%EDTA等组成,经过滤除菌。本试剂可以直接用于培养细胞的消化,或者一些组织的消化,通常室温下1min左右就可以消化下大多数贴壁细胞。

 

产品组成:

                               编号

名称

CC0130

Storage

Trypsin-EDTA solution(0.25%:0.02%)

100ml

-20

使用说明书

1

 

 

 

 

 

自备材料:

1、         PBSHanks液或无血清培养液

2、         显微镜

3、         离心机

 

操作步骤(仅供参考)

1、贴壁细胞的消化

①吸除培养液,用无菌PBSHanks液或无血清培养液洗涤细胞一次,以去除残余的血清。

②加入少量Leagene Trypsin-EDTA solution,略盖过细胞即可,室温放置0.52min,不同的细胞消化时间有所不同。

③显微镜下观察,细胞明显收缩,并且肉眼观察培养器皿底部发现细胞的形态发生明显的变化;或者用枪吹打细胞发现细胞刚好可以被吹打下来,吸除胰酶细胞消化液。加入含血清的完全细胞培养液,吹打下细胞,即可直接用于后续实验。

④如果发现消化不足,则加入Trypsin-EDTA solution重新消化。

⑤如果发现细胞消化时间过长,未及吹打细胞,细胞已经有部分直接从培养器皿底部脱落,直接用胰酶细胞培养液把细胞全部吹打下来。10002000g离心1min,沉淀细胞,尽量去除胰酶细胞消化液后,加入含血清的完全培养液重新悬浮细胞,即可用于后续实验。

2、组织的消化

不同的组织需要消化的时间相差很大,通常以消化后可以充分打散组织为宜。

 

注意事项:

1、  尽量减少反复冻融的次数,以免失效。

2、 在使用胰酶细胞消化液的过程中,要特别注意避免消化液被细菌污染。

3、 胰酶细胞消化液消化细胞时间不宜过长,否则细胞铺板后生长状况会较差。

4、 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

 

有效期: 12个月有效。

 

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