HB170817
Hieff NGSTM RNA Cleaner
产品信息
产品名称 | 产品编号 | 规格 | 储存 | 价格(元) |
Hieff NGSTM RNA Cleaner | 12602ES01 | 1 mL | 2-8℃保存 | 366.00 |
12602ES08 | 5 mL | 2-8℃保存 | 1066.00 | |
12602ES56 | 60 mL | 2-8℃保存 | 4266.00 | |
12602ES75 | 450 mL | 2-8℃保存 | 38566.00 |
产品描述
本试剂盒利用独特的磁珠与缓冲液系统,可以特异性地吸附RNA,有效去除蛋白、盐离子和其它杂质。常用于纯化去除rRNA后的总RNA样本,体外转录的RNA产物,RNA标记产物以及合成的RNA等。纯化后的RNA适用于RNA文库构建、RT-PCR、qRT-PCR、芯片分析、Northern Blot和RNAi等实验。
运输与保存方法
冰袋运输。2-8℃保存,效期一年。避免冷冻!
使用方法
所需额外试剂:
100% 乙醇,Nuclease-free水,磁力架,Nuclease-free离心管。
实验前准备:
(1)将RNA clean beads 从4 ℃取出,平衡至室温(约30 min)。
(2)在一个Nuclease free PCR管中,用Nuclease-free水将0.5-5 μg总RNA稀释至50 μL。
RNA纯化:
(1)颠倒或涡旋振荡使磁珠充分混匀,吸取2×磁珠(100 μL)加入总RNA样品中(50 μL),用移液器吹打6次充分混匀。
(2)室温孵育5 min,使RNA结合到磁珠上。
(3)将样品置于磁力架上5 min,待溶液澄清后,小心移除上清。
(4)保持样品置于磁力架上,加入200 μL新鲜配制的80%乙醇,漂洗磁珠,室温孵育30 s,小心移除上清。
【注】1)漂洗时使用的80%乙醇需要使用Nuclease-free水新鲜配制,以防止引入RNase酶导致RNA降解。
2)建议在该轮漂洗后,室温静置2 min,再进行下一轮漂洗,有助于提升RNA回收效率。
(5)重复步骤4,共漂洗2次。
(6)保持样品始终处于磁力架上,开盖空气干燥磁珠5 min。
【注】磁珠开盖晾干时要避免过分干燥,如果磁珠出现龟裂,则提示磁珠过分干燥,此时RNA的洗脱效率会降低。
(7)将样品从磁力架上取出,加入21 μL Nuclease-free 水,用移液器吹打6次以充分混匀,室温静置5 min。
(8)将样品置于磁力架5 min,待溶液澄清后,小心转移上清20 μL至一个新的Nuclease-free PCR管中。
【注】建议转移上清时留2-3 μL液体,以免吸到磁珠影响后续实验。得到的RNA极不稳定,建议尽快进入下一步。若
要保存,请置于-80℃保存。
注意事项
1)磁珠使用前务必平衡至室温后混匀,否则可能影响样品的回收效率。
2)操作过程要严格保证无RNase酶和核酸污染。
3)80%乙醇需现用现配,否则将影响回收效率。
4)本产品和其他试剂配套使用时,请按照具体实验说明来进行操作。
5)为了您的安全和健康,请穿戴实验服并戴一次性手套操作。
结果展示:
使用总RNA纯化试剂盒纯化前后,RNA样品qRT-PCR Ct值变化
RNA样品 | 人 | 小鼠 | 拟南芥 | |||
检测基因 | Gapdh | β-actin | Gapdh | β-actin | PP2A | TUB2 |
纯化前Ct值 | 12.92 | 12.36 | 18.74 | 18.53 | 24.33 | 22.2 |
纯化后Ct值 | 12.32 | 11.89 | 17.62 | 17.91 | 23.38 | 21.35 |
【注】使用Hieff NGSTM RNA Cleaner可以有效去除影响RT-PCR的抑制剂,让检测结果更加真实。
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