2×HieffTM PCR Master Mix (With Dye)
产品信息
产品名称 | 产品编号 | 规格 | 储存 | 价格（元） |
2×HieffTM PCR Master Mix (With Dye) | 10102ES03 | 1ml | -20℃ | 30.00 |
产品描述
2×HieffTM PCR Master Mix是即用型的常规PCR预混合溶液，含有HieffTM Taq DNA Polymerase（货号：10101）、dNTP混合物、MgCl2以及优化的缓冲体系。反应时只需加入引物和模板即可进行扩增，大大简化实验的操作步骤。
产品中含有溴酚蓝染料，PCR产物可以直接进行电泳。本产品中含有优良的稳定剂，在4℃条件下可以放置3个月。PCR产物具有3’-dA突出端，可轻松克隆至T载体。
反应体系（50μl） 扩增程序
组分 | 体积（μl） | | 循环步骤 | 温度（℃） | 时间 | 循环数 |
模板DNA | 适量 | | 预变性 | 94 | 5min | 1 |
引物1（10μM） | 2 | | 变性 | 94 | 30sec | 35 |
引物2（10μM） | 2 | | 退火 | 50-60 | 30sec |
2×HieffTM PCR Master Mix | 25 | | 延伸 | 72 | 30sec/kb |
ddH2O | to 50 | | 终延伸 | 72 | 10min | 1 |
【注】：使用前请务必将其彻底混匀。
a）模板使用量：基因组DNA：50～200ng；质粒DNA：0.1～10ng。
b）Mg2+浓度：本产品中含有3mM的MgCl2，适合大部分PCR反应。
c）退火温度：请参考引物的理论Tm值，退火温度可设置低于引物理论值2-5℃。
d）延伸时间：分子鉴定建议30sec/kb。基因克隆建议60sec/kb，以保证产物量达到最高。
注意事项
本产品PCR产物不适用于聚丙烯酰胺凝胶电泳。如有需要，请选择本公司产品（货号：10101）。
应用实例
图1： 2×HieffTM PCR Master Mix扩增1.2kb片段。产品分别在-20℃放置1年，4℃放置3个月，25℃放置1个月后均可有效扩增目的片段。模板：拟南芥基因组；退火温度：60℃；延伸时间：40sec。
运输与保存方法
冰袋运输。-20℃保存。有效期两年。
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