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产品内容：
试剂一：液体2 mL×1瓶，4℃保存。
试剂二：液体5mL×1瓶，4℃保存。
试剂三：液体10mL×1瓶，4℃保存。
试剂四：粉剂×1瓶，4℃保存。临用前加入5mL蒸馏水备用。
试剂五：粉剂×1瓶，4℃避光保存。加****（自备）50 mL充分溶解。
试剂六：液体20mL×1瓶，4℃保存。
标准品：液体1mL×1支，4000 nmol/mL Hg2+，室温保存。临用前用水稀释400倍即10nmol/mL标准溶液。
产品说明：
Hg2+是水体中重要有毒重金属离子，易被生物体吸收并且积累，能够通过食物链进一步传递，从而造成伤害。典型的水俣病就是*中毒的一种。
水样经消化后，在酸性环境中，Hg2+能与二硫腙生成橙色络合物，溶于****，在490nm测定吸光度，即可计算Hg2+含量。
自备仪器和用品：
台式离心机、可见分光光度计、水浴锅、1mL玻璃比色皿、可调式移液枪、浓硫酸、浓**、氯仿、蒸馏水。
操作步骤：
一、样品处理
每采集1000mL水样后立即加入7mL**，调节每个样品的pH，使之低于或等于1。若取样后不能立即测量，向每升样品中加入试剂二4mL或更多，使之呈现持久的淡红色。
二、测定步骤：
1、 可见分光光度计预热30min以上，调节波长至490nm，氯仿调零。
2、 操作表：
在5mLEP管中分别加入
试剂名称（μL） | 测定管 | 标准管 | 空白管 |
水样 | 1000 | - |
|
标准溶液 | - | 1000 |
|
蒸馏水 | - | - | 1000 |
浓硫酸 | 40 | 40 | 40 |
浓** | 10 | 10 | 10 |
试剂一 | 32 | 32 | 32 |
试剂二 | 60 | 60 | 60 |
封口膜封口，充分混匀，震荡2min。95℃水浴中消化2小时，冷却至大约40℃。 | |||
试剂三 | 200 | 200 | 200 |
震荡至EP管内溶液澄清透明，开盖放置10min，期间摇荡数次，使其中气体溢出。 | |||
试剂四 | 80 | 80 | 80 |
试剂五 | 1000 | 1000 | 1000 |
盖紧后充分震荡2min，静置10min，吸取下层有机相至1.5mL EP管中。 | |||
试剂六 | 400 | 400 | 400 |
充分震荡使有机相无绿色，静置分层后吸取有机相测定其在490nm波长下的吸光度，分别记为A测定，A标准，A空白，计算ΔA测定=A测定-A空白，ΔA标准=A标准-A空白。 | |||
三、*离子浓度计算：
Hg2+（nmol/mL）= C标准品×ΔA测定÷ΔA标准=10×ΔA测定÷ΔA标准。
C标准品：标准品浓度，10 nmol/mL。
注意事项：
1. 水样中1000μg/L铜离子，20μg/L银离子，10μg/L金离子，5μg/L铂离子对测定无干扰。
2. 测定过程中应注意安全，佩戴口罩和手套，以免吸入或沾到有毒及危险试剂。
3. 当吸光度大于1时，建议稀释后测定。
4. 含悬浮物和（或）有机物较少的水可把加热时间缩短为1h，不含悬浮物的较清洁水可把加热时间缩短为30min。
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