pGL3-Control VectormiRNA 靶基因的3’UTR 克隆的构建

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更新: 2021-07-01
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拓然生物构建您所要研究的miRNA靶基因3’UTR区域,您只需将miRNA mimics与构建好的靶基因载体共转,即可检测miRNA是否对靶基因有调控作用。报告基因质粒载体转录后可形成萤火虫荧光素酶与靶基因3’UTR区域组合而成的特殊mRNA,如果miRNAmimic能够与包含靶基因3‘UTR的mRNA互补结合,则荧光素酶的表达活性也收到显著调控,故通过检测荧光素酶的荧光强度即可定量分析miRNA对靶基因的mRNA调控效果。当您需要筛选与疾病相关的miRNA时,只须将疾病基因的3’UTR报告载体与miRNA文库共转, 通过萤火虫荧光素酶的活性分析,即可获得miRNA对潜在靶基因的调控作用的验证数据,高效,准确。由于报告基因的3’UTR长度不一,大多数长度为1~2.5kb之间。一般建议构建长度不超过2.5kb,同时建议构建单位点突变载体。