货号: | EZWB01-50 |
供应商: | 上海万生昊天生物技术有限公司 |
规格: | 2*25 |
ECL化学发光检测试剂是基于Luminol的新一代增强型化学发光底物试剂,可与二抗上偶联的辣根过氧化物酶(Horseradish Peroxidase,HRP)催化发生化学反应而发出荧光,结果可以通过X光片压片和其他显影技术展现或使用Luminometer检测。
EZbiolab Super ECL Plus超敏发光液比DAB显色灵敏度高千倍以上,比Amersham的ECL发光液灵敏度高百倍以上,比Pierce的SuperSignal West Pico Substrate灵敏度高1~5倍。在暗房内高丰度蛋白条带的荧光常常数小时内仍然肉眼可见,X线胶片曝光5~30s即可得到高清晰条带;低丰度蛋白条带荧光肉眼可能不易察觉,但曝光30s~5min即可检测条带;极低丰度的蛋白条带荧光可允许30min~12曝光以检测目的条带。Super ECL Plus超敏发光液衰减较慢,20min内荧光几无减弱,检测时产生的非特异背景非常低,也可节省抗体和待测样品的用量,该试剂可用于PVDF膜和NC膜。
产品组成:
编号 名称 | EZWB01-50 | EZWB01-100 |
试剂(A) | 25ml | 50ml |
试剂(B) | 25ml | 50ml |
保存条件:
4℃保存,12月有效。如果长期不用,-20℃可以保存更长时间。
注意事项:
1. A液和 B液在吸取过程中必须要更换枪头,上述试剂相互污染后会导致 A液或B液逐
渐失效,影响后续的使用效果。
2. 为获得最佳实验效果,应注意优化实验条件,包括实验检测样品的用量、一抗稀释
度、二抗稀释度、杂交膜及封闭液的选择等。
3. 当使用亲和素/生物素系统时,应避免使用含有脱脂奶粉的封闭液。
4. 洗涤液、封闭液、抗体稀释液、ECL工作液应足量使用,确保印迹膜处于湿润状态。
5. 洗涤液、封闭液中避免使用叠氮钠,防止后者抑制HRP活性。
6. 各溶液使用后,请盖紧瓶盖以防失效, 特别是HRP Substrate Peroxide Solution含有氧化剂,比较容易被还原而失效。
7. 荧光持续时间很长,但开始反应后的30min内荧光更强一些,随后荧光会逐渐减弱,因此请注意充分利用这荧光较强的30min进行曝光或成像仪检测。
8. A液和 B液均对人体有害,操作时请注意适当防护。
9. 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用说明:
1. Western二抗孵育数次洗涤后,用镊子将膜轻轻取出,用吸水纸略吸去过多的液体(勿接触膜的蛋白面),然后置于一洁净保鲜膜或恰当容器上。
2. 配制ECL工作液: 根据需要量,取A液和 B液等体积混合即为ECL工作液,室温放置备用,工作液宜在临检测前配制。
3. 根据膜的大小,按每10平方厘米膜1mlECL工作液的比例,滴加ECL工作液到膜上,确保使工作液均匀覆盖在膜上,放置1~3min。
4. 取膜,弃工作液,用吸水纸略吸去过多的液体。将膜放在两片保鲜膜中间(避免膜与膜之间产生气泡),随后进行压片检测或荧光成像仪检测。
5. 在暗室内进行X-光胶片曝光,立即显影定影,根据结果再调整压片时间,或直接分别曝光0.5,1,3,5min,然后一起显影定影观察结果。 亦可采用荧光成像仪检测:将膜放置到荧光成像仪内,参考仪器说明书进行检测。
相关产品:
产品编号 | 产品名称 | 包装 |
EZWB03 | Western抗体洗脱液 | 500ml |
EZWB04 | Western封闭液(BSA) | 100ml |
EZWB06 | Western抗体稀释液 | 100ml |
EZWB07 | 转膜缓冲液(NC,PVDF) | 500ml |
EZWB09 | Western洗涤液(20x TBST, pH7.5) | 500ml |
温馨提示:不可用于临床治疗。