诺如病毒诊断试剂酶免技术、IDEIA

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更新: 2019-06-11
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       诺如病毒感染性腹泻是由诺如病毒属病毒引起的腹泻,具有发病急、传播速度快、涉及范围广等特点,是引起非细菌性腹泻暴发的主要病因。诺如病毒感染性强,以肠道传播为主,可通过污染的水源、食物、物品、空气等传播,常在社区、学校、餐馆、医院、托儿所、孤老院及军队等处引起集体暴发。

诺如病毒感染性腹泻在全世界范围内均有流行,全年均可发生感染,感染对象主要是***和学龄儿童,寒冷季节呈现高发。在发展中国家,诺如病毒感染性腹泻普遍存在,也常引起暴发流行。在我国5岁以下腹泻儿童中,诺如病毒检出率为15%左右,血清抗体水平调查表明我国人群中诺如病毒的感染亦十分普遍。
    用于人类粪便中的诺如(诺瓦克)病毒检测,用于肠胃病暴发时的快速检测。采用IDEIA酶免技术。
1.        用途
用于体外诊断。 诺如病毒快速检测试剂卡(免疫层析法)是用免疫层析的方法快速定性测定人粪便样本中,基因1型(GG1)和基因2型(GG2)的诺如病毒。该试剂可以协助诊断胃肠炎,分析有疑似诺如病毒胃肠炎症状的儿童和***的粪便样本。
2.        检测摘要与说明
诺如病毒是一个引起世界性感染的胃肠炎的主要原因,估计美国每年约有23000000的病例(12)。该病毒经常在公共场所中爆发,如育婴室、医院、托儿所、监狱和油轮(345)。诺如病毒爆发的报导比细菌性致病原所致爆发的报道要更常见,说明诺如病毒对公共健康有很相当的影响(6)。
诺如病毒快速检测试剂卡(免疫层析法),应用单克隆抗体,快速、可靠地检测粪便标本中的抗原,从而使病人能够尽快开始治疗。这种快速检测可以直接地、敏锐地同时检测诺如病毒基因1型和基因2型抗原。尤其适合检测样本数量少的样本。
3.        检测原理
诺如病毒快速检测试剂卡(免疫层析法)为快速、多步法侧流免疫层析检测,应用了抗诺如病毒抗原的单克隆抗体。在加样孔旁的反应窗内,有两条包被了固定抗体的平行线。检测线(T)包含了抗诺如病毒抗原的抗体。质控线C包含了抗鼠IgG的抗体。酶标记物1包含了生物素化的抗诺如病毒抗原的抗体,酶标记物2是由结合了辣根过氧化物酶的链霉菌抗生物素蛋白组成。检测过程中,先从已经准备好的粪便样本悬浊液中,吸取一定量的上清液,与一定量的酶标记物1混合,加入检测卡较小的窗口中(加样孔)。经过室温下10 分钟的孵育后,样本和酶标记物混合液被检测膜吸收后,在过滤片上移动。在这个过程中,诺如病毒阳性标本中的抗原-酶标记物复合物,与检测线上固定的抗诺如病毒抗体结合,没有结合抗原的生物素化的抗体则结合在质控线上。之后加入酶标记物2,在室温下孵育分钟,结合了过氧化物酶的链霉菌抗生物素,与通过特异性抗体而固定在膜上的生物素结合。
    在反应窗加入洗液,洗掉没有结合的过氧化物酶。如果测试为诺如病毒阳性,加入底物后三分钟,在检测线(T)上就会出现蓝线,同时质控线(C)上也会出现蓝线。如果质控线没有变蓝,说明这次检测的操作存在问题,结果不可以用于诊断。
4.        试剂盒组成
试剂盒内的试剂足够进行20次检测
测试卡     Cassette      20次检测   内装20个独立包装的测试卡
稀释缓冲液 Diluent       30 ml 样本稀释缓冲液,氯化钠蛋白缓冲液,即用,含0.1% Kathon CG;开瓶即用,蓝色
洗液      Wash          10ml 洗液,***酸化的氯化钠,含0.1% Thimerosal,开瓶即用
酶标记物Conjugate│1   7ml 稳定蛋白溶液中的生物素标记的抗诺如病毒抗体,开瓶即用,蓝色
酶标记物Conjugate│2   5ml 稳定蛋白溶液中的链霉菌过氧化物酶,开瓶即用
底物       Substrate    7ml 过氧化氢/TMB,开瓶即用
吸液管     Pipet         25每包中装有25支有刻度标记的一次性塑料吸样管