scFv噬菌体展示系统

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更新: 2021-05-28
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【原理】  噬菌体展示技术是将多肽或蛋白质的编码基因或目的基因片段克隆入噬菌体外壳蛋白结构基因的适当位置,在阅读框正确且不影响其他外壳蛋白正常功能的情况下,使外源多肽或蛋白与外壳蛋白融合表达,融合蛋白随子代噬菌体的重新组装而展示在噬菌体表面。被展示的多肽或蛋白可以保持相对独立的空间结构和生物活性,以利于靶分子的识别和结合。肽库与固相上的靶蛋白分子经过一定时间孵育后,洗去未结合的游离噬菌体,然后以竞争受体或酸洗脱下与靶分子结合吸附的噬菌体,洗脱的噬菌体感染宿主细胞后经繁殖扩增,进行下一轮洗脱,经过3轮~5轮的“吸附-洗脱-扩增”后,与靶分子特异结合的噬菌体得到高度富集。所得的噬菌体制剂可用来做进一步富集有期望结合特性的目标噬菌体。  噬菌体展示技术成为探测蛋白空间结构、探索受体与配体之间相互作用结合位点、寻找高亲和力和生物活性的配体分子的有利工具,在蛋白分子相互识别的研究、新型疫苗的研制以及肿瘤治疗等研究领域产生了深远的影响。肽库(peptide library)的应用为确定表位序列以至其构象提供了另一有力工具。【内容】  A.融合表达宿主菌TG1(15%甘油保存);  B.噬菌粒载体pCANTAB5e(DNA溶于TE Buffer,浓度50ng/ul);  C.辅助噬菌体M13K07(滴度为1.2×1012pfu/ml);  【保存】噬菌粒载体、宿主菌保存于-20℃。辅助噬菌体请存放在4℃即可,不可冻存。【其他说明】详细说明请参考 请登陆www.bio-viewshine.com