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分子克隆与质粒构建服务.pdf
分子克隆与质粒构建服务服务概述克隆构建是分子生物学研究中最常用的手段之一，也占据了大量的科研时间和精力，巴傲得生物利用Bioworld研发平台推出分子克隆与载体构建服务，让您的实验省时省力省心。1. TA克隆特点高品质保障，高特异性、保真度和性能；任何高难度的基因，未能调取或完成，不收取任何费用；利用Bioworld研发平台，拥有多种真核生物（细胞）或组织的cDNA文库服务流程1） 总RNA（基因组DNA）的提取2） 以总RNA（基因组DNA）为模板通过RT-PCR（PCR）扩增得到目的基因3） PCR产物和pMD19-T载体连接4） 转化及筛选重组子5） 重组子测序及结果分析送样要求1） 实验材料：须新鲜，请您采样后立即放入液氮中速冻或加入样品稳定剂；2） 基因组DNA或总RNA：无明显降解，总量大于4 mg。提供结果含有目的基因的质粒及菌种（或PCR产物），提供测序报告文件。质量保证由于材料的个体差异及PCR过程中会产生突变等原因，我们不保证获取的基因与参考序列的碱基完全一致。2. 亚克隆特点丰富的载体构建经验，成功率高通过各种DNA克隆方法，可以短时、高效、保质地完成服务服务流程1）PCR产物TA克隆：克隆至带有“T”末端的载体上，如pMD19-T2）目的基因亚克隆：将含有目的基因的质粒采用酶切方法克隆至商品化的表达载体或改造后的特殊载体上3）以质粒为模板PCR扩增目的基因后克隆：将质粒上的一段序列通过PCR加入酶切位点或将几个不同来源的片段通过PCR拼接后进行克隆。送样要求1） 模板信息：原始序列名称2）目的载体信息：客户自己构建的质粒须提供测序结果3）目标DNA片段序列及两端酶切位点4）非常用限制性内切酶由客户自己提供，或我们帮忙订购，费用由客户自理，剩余产品返回。提供结果含有目的基因的质粒及菌种（或PCR产物），提供测序报告文件。质量保证由于材料的个体差异及PCR过程中会产生突变等原因，我们不保证获取的基因与参考序列的碱基完全一致3. 定点突变特点可以应用到氨基酸置换、碱基插入、缺失、标签插入、酶切位点插入、缺失等多个方面。使用商业化的Kit或overlap-PCR等方法进行实验，在短时间内即可获得突变好的基因。服务流程1） 向指定位置进行碱基置换、插入或者缺失，制作变异导入的基因2） 使用Mutazyme™酶消化甲基化质粒模板，而选择突变质粒DNA3） 转化大肠杆菌，挑选转化子进行测序鉴定送样要求1）模板质粒（>100 ng/μl，总量≥5 μg）或者新鲜的甘油菌液2）突变前后的碱基序列及相应载体信息（名称、大小、抗性）3）基因两端酶切位点提供结果提供突变好的质粒、甘油菌及报告和测序电子文件质量保证保证测序结果与指定的突变完全一致，并保留客户原始序列的完整性服务价格信息：BQ0001 TA克隆（小于800bp） 300元/克隆 包含一次测序BQ0002 TA克隆（800bp到2kb） 500元/克隆 包含一次测序BQ0003 TA克隆（大于2kb） 800元/克隆 包含一次测序BQ0004 质粒构建（小于1kb） 1000元/亚克隆 包含引物合成、测序费用BQ0005 质粒构建（1kb到2kb） 1200元/亚克隆 包含引物合成、测序费用BQ0006 质粒构建（2kb到3kb） 1500元/亚克隆 包含引物合成、测序费用BQ0007 定点突变（小于1kb 一个位点） 1000元/次 BQ0008 定点突变（小于1kb 两个位点） 1800元/次 相邻的两个碱基突变按照一个位点收费BQ0009 定点突变（小于1kb 三个位点） 2600元/次 相邻的两个碱基突变按照一个位点收费BQ0010 定点突变（1kb到2kb 一个位点） 1600元/次 BQ0011 定点突变（1kb到2kb 两个位点） 2600元/次 相邻的两个碱基突变按照一个位点收费BQ0012 定点突变（1kb到2kb 三个位点） 3500元/次 相邻的两个碱基突变按照一个位点收费
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