小鼠CA9酶联免疫检测试剂盒

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单价: 1130.00
品牌: ZYscience
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更新: 2024-11-15
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货号: H-EL-CA9
样本: 血清/组织/尿液
标记物: 见说明书
适应物种: Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Rabbit, Sheep
应用: 科研
检测方法: 酶联免疫
检测限: 见说明书
供应商: 泽叶生物
数量: 10
规格: 96T/盒
小鼠CA9酶联免疫检测试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。用抗小鼠CA9抗体包被于酶标板上,实验时样品或标准品中的小鼠CA9与包被抗体结合,游离的成分被洗去。依次加入生物素化的抗小鼠CA9抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。抗小鼠CA9抗体与结合在包被抗体上的小鼠CA9结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下呈现蓝色,加终止液后变成黄色。用酶标仪在450nm波长处测OD值,小鼠CA9浓度与OD450值之间呈正比,通过绘制标准曲线计算出样品中小鼠CA9的浓度。
英文名称 Mouse CA9 (Carbonic Anhydrase IX) ELISA Kit
中文名称 小鼠碳酸酐酶IX (CA9)酶联免疫吸附测定试剂盒
货号 H-EL-CA9 种属 Mouse/小鼠
规格 96T/Kit (8*12 strips) 48T/Kit (8*6 strips)
检测方法 双抗体夹心法
检测范围 15.625~1000pg/mL 灵敏度 9.375pg/mL
检测时的问题:
1.为什么标准品的OD值会是上图的结果?真的是想不出来为什么会这样呀?
答:你的标准品除了标4中有一孔偏低至0.622外,其余几乎无任何线性,实际上我怀疑你的标40.622这孔做的有问题,真实的结果应该是全部标准曲线OD值都应该在1.5—2.0左右波动,试剂盒的标曲可看出有明显的线性关系:
2.小鼠CA9酶联免疫检测试剂盒虽然待测样品3个复孔间差异不是很大,但我们也可以看到所有的待测样品OD值差异也不是很大,其中样9和样10为正常人尿标本,其值也很大,所以,想请问一下,这种现象正常吗?
答:血管紧张素原正常人和病人之间是否有差异,完全取决于血管紧张素原这个指标与某种疾病之间特异性、敏感性怎么样,如果大量的文献显示正常组与患病组间存在显著差异,那我认为你这个结果不正常。我之前提示过你:“在看定量的试剂盒至少要有一个0点吧毕竟它代表了试剂盒包被抗体和酶标抗体的交叉反应情况(也就是试剂盒的背景),样本定值时至少要减去0点在定量吧,可使你的试剂盒只有一个空白孔(不加酶标试剂)只能算作显色液的背景”如果你上图结果中的空白孔还是不加酶标试剂的话,我怀疑你的试剂盒酶标试剂和板有交叉反应,你所有的样本OD值可能都是你试剂盒交叉反应的结果,你可以用纯化水或试剂盒中的样稀(里面肯定不含有血管紧张素原)当做样本进行加样,洗板后加酶,最终看看OD值是多少!
3.小鼠CA9酶联免疫检测试剂盒加入终止液后,有的孔的颜色没有立即由蓝色变为黄色(比如前边的标准孔,但随着加后边的样,前边的孔就会完全变成黄色。),所以,后边的孔加了终止液之后,如果没有完全变为黄色,此时,我应该立即测OD值呢?还是应该等全都变黄色之后再测呢?
答:颜色没有立即变蓝的原因可能是终止液的酸度不是太强,这个跟试剂盒有关系,你不用管,必须等到全部变成黄色才能读值,因为OD450nm,就是对黄色有最大吸收。
4.小鼠CA9酶联免疫检测试剂盒由上图可以看到,虽然都在规定的时间内测得OD值,同一孔的数值也发生生了变化,有的孔变大了,有的孔变小了,这是什么原因造成的呢?我该以哪一次的数值为准呢? 
答:多样本的OD值第一次测定高、第二次低、第三次又再次高上去说明你的酶标仪这个仪器本身的变异有点大,其实以那一次的结果都可以,因为如果是合格的试剂盒,即使OD值有所变化,但是不同组间的差异一定还是能看出来的。
温馨提示:不可用于临床治疗。