SDS-PAGE样品制备试剂盒使用修饰过的硅藻土的独特树脂来结合DMSO中的蛋白。仅需要将2-350微升样品和20微升Thermo Scientific PAGEprep树脂及DMSO混合即可,样品中最高的蛋白浓度为70微克。在蛋白结合到树脂上之后,洗涤掉未结合的污染物。最后使用50微升洗脱缓冲液洗脱样品即可。回收的蛋白样品可以与试剂盒中提供的5X 上样缓冲液混合以便进行电泳。而且洗脱缓冲液与Thermo ScientifiBCA蛋白定量分析试剂盒兼容,在上样前确定最终的蛋白浓度。
很多种物质都会与常规上样缓冲液中的成分产生反应,从而对聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)产生干扰。例如将含有6M 盐酸胍的蛋白样品与Laemmli缓冲液混合会产生沉淀并导致样品在凝胶中的电泳效果不理想。幸运的是,使用SDS-PAGE样品制备试剂盒可以净化样品中含有的诸如促溶剂、去污剂、脂质、盐甚至是极端的pH等有影响的因素。
产品特点:
- 减少由于不兼容污染物造成的电泳假象,提供重复性好的SDS-PAGE结果。
- 快速且容易使用的离心管形式(微量离心)。
- 在20分钟以内将稀释的蛋白溶液富集成六倍浓缩液。
- 无需透析即可去除染料、还原剂、去污剂、糖、甘油、胍、尿素及硫酸铵。
- 对于大多数蛋白可以得到75-85%的蛋白回收率。
- 洗脱缓冲液与BCA蛋白定量分析试剂盒兼容,因此可以对处理过的样品进行定量。
- 最少可以处理2微升样品。
通过Thermo Scientific SDS-PAGE样品制备试剂盒可以高效地去除干扰性的物质。
对照(水) | 6M尿素 |
1M氯化钠 | 10%CHAPS |
2 M硫酸铵 | 25%甘油 |
20%SDS | 10%OTG |
10% Triton*去污剂 | 2 M盐酸胍 |
6 M尿素:DMSO(比例为1:3) | 40%蔗糖 |
降低由于去污剂造成的条带扭曲。使用Thermo Scientific Mem-PER试剂盒(产品货号89826)抽提细胞得到含有去污剂的膜蛋白组分(m)及可溶蛋白组分(s),然后利用SDS-PAGE分析分别用或没用SDS-PAGE样品制备试剂盒处理后的两个组分。图片是利用化学发光法蛋白质免疫印迹分析细胞色素氧化酶亚基4(COX 4)。试剂盒处理过的样品去除了干扰电泳的去污剂,而保持原始样品中相关蛋白的水平。
使用Thermo Scientific SDS-PAGE样品制备试剂盒可以得到稳定的蛋白回收率。利用试剂盒处理分子量分别为30K、44K、80K、86K、12K的纯蛋白(60微克)及细菌裂解物。利用BCA蛋白定量分析试剂盒测定蛋白浓度并计算蛋白回收率百分数。
高效回收并浓缩蛋白样品。对浓度为0.1毫克/毫升的纯化的牛血清白蛋白(BSA)样品进行电泳,并利用考马斯染料(产品货号24590)进行染色。泳道1: 分子量标准(产品货号26691)。泳道2:10微升(1微克)的BSA样品。泳道3:利用SDS-PAGE样品制备试剂盒处理后的10微升BSA样品。泳道4:利用SDS-PAGE样品制备试剂盒处理200微升BSA样品,然后用20微升上样缓冲液进行回收。将泳道3与泳道2进行比较可知蛋白回收率很高。将泳道4与泳道2进行比较可知对原样品进行了10倍的浓缩。
订购信息:
产品货号 | 描述 | 包装 | 价格 |
89888 | SDS-PAGE样品制备试剂盒 可处理50个样品。 包括: PAGEprep树脂(浆状物,溶剂为DMSO) PAGEprep洗脱缓冲液 DMSO 离心收集管 - **纤维素薄膜滤器 收集管 泳道指示剂,非还原性上样缓冲液(5X) | 试剂盒 1ml 5ml 27ml 50个 72个 5ml | ¥1,940 |
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产品货号 | 描述 | 价格 |
23225 | BCA蛋白定量分析试剂盒 | ¥2,033 |