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Thermo Scientific 蛋白重折叠试剂盒提供使用矩阵方法来确定重组蛋白重折叠的缓冲体系，其中，重组蛋白是通过从包涵体中变性、溶解得到的。基础缓冲体系所形成的矩阵中包含了防止蛋白聚集的强和弱的变性条件。并且可以根据重折叠的蛋白类型的不同向其中加入额外的矩阵因子（详情见下表）。可以检测三个浓度水平的缓冲液成分，因此可以在一个实验中测试多种重折叠条件。可调节的设计确保能够筛选出针对目标蛋白的特定重折叠条件，防止浪费样品和进行不必要的分析，同时可以最大化重折叠的产量。蛋白重折叠试剂盒中有一份详尽的重折叠指南，其中包括分离、溶解和纯化包涵体的详细信息；优化重折叠条件的详细信息；以及分析重折叠收率的详细信息。利用Thermo Scientific重折叠试剂盒设计并配制重折叠矩阵。
基础重折 叠缓冲液† | 因子1胍‡ (M) | 因子2 L 精氨酸(M) | 因子3添 加剂 1†† | 因子4添 加剂 2†† |
1 | 0 | 0 | 1 | 1 |
2 | 0 | 0.44 | 2 | 2 |
3 | 0 | 0.88 | 3 | 3 |
4 | 0.55 | 0 | 2 | 3 |
5 | 0.55 | 0.44 | 3 | 1 |
6 | 0.55 | 0.88 | 1 | 2 |
7 | 1.1 | 0 | 3 | 2 |
8 | 1.1 | 0.44 | 1 | 3 |
9 | 1.1 | 0.88 | 2 | 1 |
† 每种基础重折叠缓冲液均以1.1X储备液的形式提供。每种储备液均含有指定浓度的变性剂以及55 mM Tris、21 mM NaCl、0.88 mM KCl，pH为 8.2。
‡ 加入增溶的蛋白样品会额外的引入胍(盐酸胍)。
††研究人员可根据其需要从提供的添加剂中挑选因子3和因子4来制备定制的重折叠条件。表中的数字表明不同添加剂的浓度水平。
产品特点：
- 可靠 – 所检测的条件和成分均为重折叠缓冲液中最常用、最重要的。
- 方便 – 三个水平的矩阵设计明显地降低第二次优化和数据分析的难度。
- 可调节 – 可以按照不同的目标蛋白定制不同的重折叠实验；详细说明了缓冲液成分之间的正向和反向的相互作用，避免了不必要的分析。
- 高纯试剂 – 按照极其严格的标准配制试剂，因此可以获得最稳定的结果。
缓冲液添加剂：
缓冲液添加剂 | 量 | 缓冲液添加剂 | 量 |
聚乙二醇(PEG) ，(10 mM) | 1ml | EDTA (100 mM) | 1ml |
二硫苏糖醇 (DTT) | 100mg | 二价阳离子溶液 | 0.5ml |
还原型谷胱甘肽(GSH) | 120mg | NaCl (5M) | 1ml |
氧化型谷胱甘肽(GSSG) | 100mg | CaCl2 | 0.5ml |
订购信息：
产品货号 | 产品描述 | 包装 | 价格￥ |
89867 | 蛋白重折叠试剂盒 100个反应/试剂盒 包括：基础重折叠缓冲液 二硫苏糖醇 (DTT) 还原型谷胱甘肽(GSH) 氧化型谷胱甘肽(GSSG) 10 mM 聚乙二醇(PEG) 二价阳离子溶液 5M NaCl 100 mM EDTA 重折叠指南 | 试剂盒 1-9 9 x 10ml 100mg 120mg 100mg 1ml 0.5ml 1ml 1ml | 4424 |
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