分子生物学：Shotgun 文库构建实验服务_紫外设备_分子生物实验仪器_仪器设备库_商城

提供商：	嘉美实验
服务名称：	分子生物学：Shotgun 文库构建实验服务

实验技术简介：全基因组shotgun文库可运用于基因组DNA序列的测定和从全基因中获得需要的基因。创新基因组为此能、提供一个高效、灵活的基因组shotgun文库构建的服务。我们有丰富的经验来构建各种来源的shotgun 文库，包括各种细菌，噬菌体，哺乳动物和其他生物的DNA。

实验技术原理：鸟枪战略（Shotgun Strategy）又称随机测序战略，是由美国塞莱拉遗传公司创始人克雷格·文特尔发明。此策略是将DNA用机械方法随机打断成小片段，并连入合适的载体构建亚克隆文库。从中随机挑取克隆测序，再通过生物信息学方法对测得的序列进行拼接组装以获得大片段DNA的序列。因此，Shotgun文库构建是后期测序，序列拼接的基础，也是鸟枪战略能否成功的关键之一。
我们可以根据要求构建不同插入片段大小的Shotgun文库，如1～2Kb，2～3Kb，3～4Kb，5～6Kb等。

实验操作流程：
1、高品质的DNA模板制备
2、随机打断DNA片段
3、将随机打断的片段和克隆载体相连，得到重组DNA
4、重组DNA转化及筛选
5、亚克隆DNA测序及质量控制
6、有效DNA的获得
7、在大多数的情况下3-4周就可完成
8、完成后将会提供给您原始的electropherograms和一块96孔板的测序数据

实验注意事项：
客户提供：
1、甘油菌液
2、沉菌
3、DNA
交付标准：
1、连接液（约10～20μl）
2、转化后的菌液（约500μl）
3、完整项目报告（材料、试剂、仪器、方法、数据分析、实验结果）
其他：
1、片段的插入大小通常<10kb
2、基本会有2x107 小片断插入的重组DNA,，1x107大片断插入的重组DNA
3、小片段的插入率95 ％，大片段的插入率90 ％

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