免疫学服务:流式细胞术检测实验技术服务

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更新: 2020-08-06
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服务名称: 免疫学服务:流式细胞术检测实验技术服务
提供商: 嘉美

1、检测指标:
DNA倍体分析、DNA含量分析、细胞周期、细胞凋亡;细胞表面抗原分析:淋巴细胞免疫分型、白血病及淋巴瘤免疫分型、血小板相关抗体分析、PNH相关抗原检测(CD55/CD59)、胞内细胞因子检测等。
2、样本及来源:
1)
细胞数量达到检测所需(细胞周期1x106、细胞凋亡3x106),生长良好,无污染,附有细胞生长照片,注明实验检测项目所需试剂盒;来源于人、小鼠、大鼠或其它。
2) 外周血:EDTA或肝素抗凝全血,5ml左右;来源于人、小鼠、大鼠或其它。
3)试剂:部分常用荧光探针,如PI等,我公司可免费提供;特殊标记物,如CD抗体等,用户须另行购买,我公司可以代购;用户所提供抗体应可与样本发生特异性识别反应。
4)样品包装要求:细胞培养在培养瓶中或操作前样本于合适的条件保存。
3、收费标准:
 
编号  规格  价格(¥)
J-FCM-1  单色标记  30/T
J-FCM-2  双色标记  50/T
J-FCM-3  三色标记  60/T


检测说明:
1、
用户需要进行流式细胞仪检测时须提前预约,同时说明实验目的、方法等。最低收费300元。
2、我公司在正式接受实验委托一周内交付实验结果。所提供实验结果忠实于样本的实际情况。
3、用户须一次性全额预付实验费。
4、由用户提供的样品或试剂所致的实验问题由用户负责。
5、请在表中说明检测具体要求,由于填写资料不详所致任何问题由用户负责。
6、请在送样的同时提供样本来源及处理方法等信息,样品检测后原则上本公司不负责保存。

                         附:流式细胞术检测样品推荐制备方法
A. 直接标记抗体(FITC标记抗体):

(1)收集1×106个细胞,800rpm离心5min,4℃以上冷PBS洗一次。
(2)用4%多聚甲醛1ml室温固定40分钟,800rpm离心5min去上清。加2ml PBS重悬洗涤细胞,800rpm离心5min。
(3)用1ml含5% 人血清的 PBS 重悬细胞,冰上孵育10min,800rpm离心5min去上清。加入200ul含0.5%BSA 和饱和剂量的荧光标记抗体(5×105个细胞/20ul抗体)的PBS ,避光冰上放置30min,离心弃上清。加入200ul 1% 多聚甲醛固定,待测即可。
(4)用流式细胞仪检测荧光值,每管计数10,000.00个细胞。
B. 未标记抗体间接免疫荧光标记法:
(1)收集2×106个细胞,用冷的PBS 2ml 洗涤细胞一次,800rpm离心5min。
(2)用2ml 4%多聚甲醛室温固定细胞40min,800rpm离心5min;2ml PBS重悬细胞,800rpm离心5min;
(3)用1ml含0.2%Triton-X100和5%血清的PBS重悬细胞,冰上放置10min,800rpm离心5min。
(4)加入饱和剂量未标记抗体,冰上放置40min,800rpm离心5min,用2ml冷的PBS 重悬细胞,800rpm离心5min,洗去未结合一抗,重复一次。
(5)加入荧光标记(FITC)标记的二抗,冰上避光放置40min后,800rpm离心5min,去上清,PBS洗涤两次。
(6)加入0.5ml 1%多聚甲醛重悬细胞;固定待测。
(7)流式细胞仪检测荧光值,每管计数10,000.00个细胞。
C.细胞周期、细胞凋亡及DNA倍体分析样品(PI染色)的制备:
(1)待测样本制成单细胞悬液,然后200g离心5分钟,弃上清。
(2)用4℃预冷的70%冷乙醇固定,4℃保存,至少固定18小时。
(3)调整细胞浓度为106细胞/毫升,取1毫升细胞悬液,用PBS洗三次,细胞重悬于1毫升PI染液中,37℃孵育30分钟即可进行流式分析。
(4)PI染液终浓度为50微克/毫升,RNase A终浓度为20微克/毫升。
 
实验具体收费、标本的收集、实验试剂的定购等事宜,请联系嘉美生物。
实验预约热线:400-698-4168   010-58464308   010-58464306
实验预约邮箱:jiamei_bj@126.com   info@jiamay.com

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