病理学服务:核仁组织区嗜银染色-AGNOR 染色实验服务

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更新: 2020-09-10
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提供商: 嘉美实验
服务名称: 病理学服务:核仁组织区嗜银染色-AGNOR 染色实验服务


实验技术简介:核仁组成区(NORs)是染色体上的一个编码核糖体 RNA(rRNA)的片段,存在于DNA特异性环上,凸向核仁。在电镜下,核仁组成区为在电子致密区中的境界不清的浅染区域。在石蜡切片上,在核仁中见到 的每一个点状反应颗粒有可能代表多个AgNOR位点。核仁组成区嗜银蛋白染色主要特点是操作简便、批量染色的较为经济,AgNOR位点的数量增加与细胞增 殖性增加有关,对于良恶性肿瘤的鉴别具有一定的意义。

 

实验技术原理:细胞的核仁中有一种参与线粒体及蛋白质合成的酸性蛋白,具有嗜银性,称为核仁组成区相关嗜银蛋白(AgNORs),可以通过胶银染色法显示出来,从而反映细胞增殖、分化情况,对良、恶性肿瘤的鉴别、分型分级、癌前病变的研究具有一定价值。

 

实验操作流程:
1、切片脱蜡入水,再至蒸馏水;
2、蒸馏水洗片;
3、取室温的试剂AgNOR银溶液、试剂AgNOR胶溶液等量混合,即为AgNOR染色工作液。室温孵育;
4、蒸馏水洗片;
5、(可选)甲基绿染色液复染,水洗凉干;
6、常规脱水,常规透明,非水溶性封片剂封片;
结果:AgNOR位点 核内黑色点状 。

 

实验注意事项:
客户提供:

1、组织样品:新鲜组织放入液氮或-80度保存,组织不少于100mg;
2、培养细胞:通过细胞计数取不少于2×106个细胞于EP管,加入0.5ml生理盐水或蛋白保护剂,混匀后保存于冰箱(-80℃,避免反复冻融);
3、血液细胞标本:以抗凝管保存血样或以淋巴细胞分离液分离细胞后加入0.5ml生理盐水或蛋白保护剂,保存(-80℃可长期保存,避免反复冻融);
4、血清或细胞培养液标本:离心去掉杂质后取上清入EP管,保存(4℃可保存15-20天,-80℃可长期保存,避免反复冻融);
5、石蜡切片,冰冻切片以及细胞爬片,涂片等。
6、样本运输:可选择以下任何一种方式寄送标本
组织样本、细胞样本以干冰运输或加入蛋白保护剂后,加冰袋寄送;
细胞样本也可直接寄送培养瓶(密封保证不污染、培养液不漏出);
血清或上清液直接加冰袋寄送(送视路程远近2-3天可到达)。

交付标准:
1、图片;
2、完整项目报告(材料、试剂、仪器、方法、数据分析、实验结果)。

其他:
1、组织固定宜采用10%福尔马林或中性福尔马林。 
2、本染色液适用于石蜡切片,切片厚度在3~4μ为宜。 
3、如需复染,可在步骤4之后用中性红复染,但应注意避免过染。 
4、配制好的AgNOR染色工作液易退化,所以最好即配即用,不易久置。 
5、为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。


Tel:010-57425721/57425722  Fax:010-80780672   
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