即酪胺(Tyramide)信号放大技术,也称CARD,Catalyzed Reporter Deposition。HRP在过氧化氢存在时可以催化酪胺为一种非常活跃的短寿命中间体,其可以共价结合到周围蛋白的富电子表面。可以在酪胺上标记荧光或者其它标记物用于检测。TSA比传统的亲和素生物素方法灵敏100倍,同时不会增加背景和非特异性信号。由于TSA只是扩大信号,而不是想原位PCR那样扩增检测目标,所以不会造成检测偏差(bias)和假阳性。
如果靶标本底生物素水平较高可以使用DNP标记的TSA Plus。DNP是生物体内罕见的分子,所以背景会更低。使用TSA Plus可以比普通TSA方法灵敏度提高50~100倍。
应用范围:ICH和ISH,芯片检测和其它任何使用HRP的超灵敏检测。