AlphaScreen利用作为供体和受体的微珠来检测生物分子的相互作用,微珠表面覆盖了一层水凝胶,作为生物连接的功能基团。当生物分子存在相互作用时,这种相互作用会将供体和受体微珠拉近,从而激发级联放大的化学反应,产生极大增强了的信号。具体来说,在激光(波长为680 nm)的照射下,供体微珠上的光敏剂将周围环境中的氧气转化为更为活跃的单体氧。单体氧扩散至受体微珠,与其上的化学发光剂反应,进一步激活了同样在受体微珠上的荧光基团,使之发出荧光,波长为520~620 nm。单体氧的半衰期为4 μSec,在溶液中的扩散距离为200 nm左右。如果生物分子不存在相互作用,单体氧无法扩散到受体微珠,则不会有荧光信号产生。AlphaScreen灵敏度极高,可达attomole级(10-18)水平。
应用范围:酶检测、相互作用检测(包括受体/配体、蛋白/蛋白、蛋白/DNA等)、免疫检测、GPCR功能检测