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I-SAGE LONG DITAG PCR MODULE
描述：SAGE™（基因表达的系列分析）技术使得以下广泛的基因组范围的表达分析成为可能：• 对基因表达水平的定量或数字化测量，实现了多重数据比较• 生成样品中转录产物的综合基因表达图谱，可以实现低量转录产物的检测和异常基因的确定(1)利用LongSAGE™ (2)生成的基因表达图谱对于低量转录产物的检测来说非常敏感，即使在不知道序列的情况下，也可以确定异常基因。LongSAGE™相对于传统的SAGE™法引入了以下几个优点：• 增加的LongSAGE™标记长度(21 bp)提供了更大的特异性，使基因之间的区分和异常基因的检测变得更容易。• 增加的标记长度实现了标记在其基因组位置的确定，使得克隆和后续分析变得更加简易。• LongSAGE™标记可以用来设计筛选cDNA库和基因特异性引物的探针，用于快速扩增cDNA末端和RT-PCR，同时有利于新基因的分离。I-SAGE™长试剂盒的工作原理I-SAGE™长试剂盒使用先前所描述过的SAGE™方法生成SAGE?库。I-SAGE™长试剂盒试验方案使用标准分子生物学技术来建立SAGE™库。库是通过分离一种称为标记的确定21bp区域而不是每个转录产物的完整序列来的建立的。标记包含可以专门识别每个mRNA转录产物的足够序列。这些标记被连接到多联体上，然后进行克隆、测序。因为PCR的所有模版均为130bp，所以没有PCR长度偏移。多联体克隆的快速高流通量测序将确定每个克隆中独立标记的数量。SAGE™分析软件将测序得出的数据以数字的形式记录下来，以备现在和将来的分析。SAGE™的数据可以与SAGEmap (www.ncbi.nlm.nih.gov/SAGE)、SAGE Genie (cgap.nci.nih.gov/SAGE)参考数据库和其他的SAGE™库相比较。SAGE™分析软件可以从www.invitrogen/sage下载。
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