服务简介 Cas9蛋白的编码框长达4kb,将Cas9基因高效导入细胞是应用CRISPR/Cas9系统进行基因编辑的难点之一,极大地限制可供选择的将基因导入细胞的方法。构建慢病毒Cas9表达体系可以有效的将Cas9转入细胞,并高效表达。为第二步转入识别靶点的gRNA筛选阳性细胞的抗性基因或荧光基因,用于同源重组模板降低了难度。如果同时将gRNA表达框包入慢病毒,可以让CRISPR/Cas9系统在细胞中一直作用下去,提 高成功概率。 服务流程 1.只转录Cas9的慢病毒直接进行Cas9慢病毒的包装,最终提供10^8 TU/mL的病毒1mL。2.同时转录Cas9和gRNA的慢病毒据给定GeneID或DNA序列,设计3个敲除位点,合成正负Oligo DNA,构建慢病毒的穿梭载体,通过测序验证穿梭载体是否构建成功。在构建成功基础上,中量摇菌,提取区内毒素的浓度达到1μg/μl的4个慢病毒包装质粒,并转染细胞,进行慢病毒生产。收集慢病毒,浓缩后进行滴度测试,最终提供10^8 TU/mL的病毒1mL。蓝盾优势: 1、价格低、周期短、质量有保证! 2、若实验未按预期完成,技术费用全免! 蓝盾提示提供的慢病毒具有侵染能力,使用时需要注意做好自身防护。