真核载体构建与细胞转染-技术服务

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更新: 2021-05-31
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 长沙南科生物技术有限公司是一家专业提供医学、生物学实验技术服务和技术解决方案的生物科技公司,能提供整套实验技术服务,从协商设计实验、代做实验、写作和代发SCI论文到课题完成。
专业提供生物医药实验技术服务
长沙南科生物
http://www.nkbio.cn
业务经理陆勇:18229848048/14726920250
技术服务项目:病理形态学、细胞生物学、分子生物学、免疫与生化、组织与基因芯片、动物实验等.

       长沙南科生物技术有限公司是一家专业提供医学、生物学实验技术服务和技术解决方案的生物科技公司,公司拥有完善的病理组织、分子生物、免疫与生化、细胞培养、病毒学、动物及裸鼠实验室,开展质粒构建、蛋白表达、抗体制作、医学及生物实验技术服务,已成功的为湘雅医学院、同济医学院、北京儿童医院、解放军301309医院、华中农大、上海华山医院、上海瑞金医院、温州医学院、武大医学院、广东医学院、第三军医、第四军医、湖南省人医、湖南省肿瘤医院、湖南农大、湖南中医大、湖北中医大等单位提供了优质的实验技术服务以及相关产品和试剂。

南科生物面对医学院及其附属医院、医药科研院所、设有生物专业高校提供单项和整体课题实验技术服务,对于握有科研课题但工作繁忙而无暇分身的临床医生而言,只需要您将课题交付我们,剩下的工作由南科生物完成,我们可以为您节约大量宝贵的时间和精力;对于面临毕业压力的广大硕博士而言,我们乐于一起探讨课题方案的合理性并给出建议,最大程度上优化实验方案和节约资金;对于课题也许您还只有一个设想,南科生物只需要您的课题设想或目标,我们愿意和您一起讨论并确定合理的课题方案并付诸实施,直至论文交付和顺利毕业。

南科生物所追求的目标不仅仅是科研课题实施的过程,更多的时候我们关注实施前后的各个环节,客户满意将是南科生物最大动力。

南科生物力求建立诚信、优质、高效的服务形象,并以此确定南科在医学、生物学实验技术外包领域的领先地位。

南科生物提供组织蜡块包埋、组织切片、HE染色、病理特殊染色、细胞培养、细胞爬片、免疫组织化学IHC,免疫细胞化学ICC、免疫荧光IF、激光共聚焦照相、细胞凋亡TUNEL染色等形态学方面的实验技术服务,包括实验材料提供(组织、细胞、抗体等)、课题设计与实验操作、图片采集与结果评价等方面的技术服务。  南科生物多年以来已建立一批人体各器官正常组织、肿瘤组织与肿瘤旁旁组织的蜡块库和一批常用人、大鼠、小鼠细胞株库存以供选择使用。客户可选择由南科生物提供实验材料或者自己提供材料,我们负责完成组织包埋处理、石蜡切片、细胞培养、细胞爬片、染色、图片采集、数据测定等全套技术服务。

真核载体构建与细胞转染:
载体构建

以PCR技术为基础,在体外将把外源基因全长或者片段与克隆载体进行连接,然后转化到宿主菌或病毒中进行克隆、筛选的技术,用这种方法获得需要的表达或干预质粒载体,进而用于生产蛋白、转染细胞,研究基因过表达或基因敲除对于细胞的影响。
载体构建基本方法:
从基因组DNA里调出长片段并克隆到目的载体上。
从组织、细胞中克隆出cDNA,并克隆到目的载体上。
通过全基因合成的方法获得cDNA并克隆到目的载体。
设计并构建真核表达载体并转染细胞。
设计和构建shRNA干扰载体。
设计和构建微小RNA(miRNA )表达载体。
注:shRNA干扰载体部分内容见RNA干扰专门章节。

所有构建的载体都经过测序验证,给客户提供原始测序结果、菌株、载体构建报告。
如果基因片段系由客户提供,客户应该对序列的正确性负责,我们仅保证将基因片段完整的克隆到目的载体上,不保证测序完全正确;如果基因由南科生物提供,我们保证100%测序正确。
南科生物提供各种常用的载体,包括通用克隆载体,表达载体、干预载体等,具体有需要请咨询,如果客户要求的载体我们没有,需要双方协商解决或者由南科生物代购。

细胞转染
将外源性基因(载体)转入细胞内,已成为研究基因与细胞功能的重要手段,目前常用的包括小RNA干预(RNAi)和外源性表达载体转入两种手段,二者分别发挥基因沉默和基因表达的功能,在实现基因敲除、鉴定基因的生物学特性、研究基因表达与沉默对于细胞生长及相关因子的影响、研究基因表达的调控机制等方面发挥重要作用。
转染的方法较多,有脂质体转染、电穿孔转染以及病毒感染等,依据转染持续时间又分为两种,一种是瞬时转染,外源性DNA不整合到细胞染色体,转染可以维持24-96小时,用于研究转染后细胞的功能变化、基因或蛋白的变化等;一种是稳定转染,外源性DNA整合到细胞染色体,可以持续表达外源性基因,用于稳定细胞株的构建。
南科生物拥有100多种常用实验细胞,实验前请客户与南科联系以确认细胞情况,我们免费提供细胞使用,可有效避免重复购买细胞株所产生的费用。

收费标准:真核
过表达质粒构建5000/个(均价),细胞基因转染实验6000元/项目包括构建质粒,转染实验费用;不包括购买细胞费用),12000元/项目(包括构建质粒,转染实验,筛选细胞费用;如需要提供细胞,请说明)

专业提供生物医药实验技术服务
长沙南科生物http://www.nkbio.cn
业务经理陆勇:18229848048/14726920250
技术服务项目:病理形态学、细胞生物学、分子生物学、免疫与生化、组织与基因芯片、动物实验等.