iTRAQ同位素标记相对和绝对定量

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更新: 2021-06-02
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提供商: 众智领先
服务名称: 同位素标记相对和绝对定量iTRAQ
规格: 样品数量,标记数量

iTRAQ 技术采用4种或8种同位素编码的标签,通过特异性标记多肽的氨基基团,而后进行串联质谱分析,可同时比较4种或8种不同样品中蛋白质的相对含量或绝对含量。
将蛋白质裂解为肽段,然后用iTRAQ试剂进行差异标记。由于iTRAQ试剂是等量的,即不同同位素在标记同一多肽后在第一级质谱检测,分子量完全相同,用串联质谱方法对在第一级质谱检测到前体离子(precursor ion)进行碰撞诱导解离,产物离子通过第二级质谱进行分析。在二级质谱分析过程中,报告基团、质量平衡基团和多肽反应基团之间的键断裂,质量平衡基团丢失,产生低质荷比(m/z)的报告离子。由于二级质谱可分析相对分子质量相差1的报告基团,不同报告基团离子强度的差异就代表了它所标记的多肽的相对丰度。同时,多肽内的酰胺键断裂,形成一系列 b 离子和 y 离子,得到离子片段的质量数,通过数据库查询和比较,可以鉴定出相应的蛋白质前体。

技术特点
 

iTRAQ技术应用:

  • 非常高的通量, 同时标记8个样品,一次实验实现多达8个样品的蛋白质鉴定和定量;
  • 标记完全,标记效率高达97%以上 可减少样本处理、以及不同组上机造成的实验误差;
  • 可以进行多个时间点蛋白质组动态变化的监测;
  • 可以分析详细分期/型的临床疾病样本,并可设计样本重复,甚至可以进行个体样本的研究;
  • 可以研究细胞周期、细胞信号传导整个过程的蛋白质组动态学;
  • 适用范围广:无物种特异性限制,理论上可用于所有物种。
分析软件:PD1.4&PD2.1 

如想了解详细技术及实验细节,请致电。