服务名称: | 重组抗体制备 |
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市场部邮箱:biokitmarket@163.com
服务概述
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服务概述
重组抗体可以通过鼠杂交瘤细胞或人B淋巴细胞或抗原激活的B淋巴细胞提取RNA并进行反转录PCR,然后进行系列基因工程方法得到抗体工程菌。
样品要求
适当保存的鼠杂交瘤细胞,瘤细胞或人B淋巴细胞或抗原激活的B淋巴细胞。
服务流程
1. 从细胞中提取RNA并进行反转录PCR;
2. 应用特有的引物通过PCR方法克隆轻链和重链基因的不同区域(可变区或其中的CDR区);
3. 将PCR产物连接到载体上;
4. 测序轻链和重链基因不同区域的克隆;
5. 报告测序数据;
6. 将克隆的片段插入特定的表达载体,构成鼠源可变区-人单抗恒定区的嵌和基因,或者用鼠源CDR区置换人单抗骨架中的CDR区;
7. 用PCR检测连接正确性;
8. 转染到适当的宿主菌或哺乳动物细胞;
9. 筛选阳性菌或细胞株并扩增;
10. 重组抗体的表达与纯化。
11. 用ELISA检测抗体特异性;
12. 保存阳性菌株或细胞株。
2. 应用特有的引物通过PCR方法克隆轻链和重链基因的不同区域(可变区或其中的CDR区);
3. 将PCR产物连接到载体上;
4. 测序轻链和重链基因不同区域的克隆;
5. 报告测序数据;
6. 将克隆的片段插入特定的表达载体,构成鼠源可变区-人单抗恒定区的嵌和基因,或者用鼠源CDR区置换人单抗骨架中的CDR区;
7. 用PCR检测连接正确性;
8. 转染到适当的宿主菌或哺乳动物细胞;
9. 筛选阳性菌或细胞株并扩增;
10. 重组抗体的表达与纯化。
11. 用ELISA检测抗体特异性;
12. 保存阳性菌株或细胞株。
完成时间
一般6个月左右。
最终产品
纯化的重组抗体,阳性菌或细胞株,实验报告。
服务费用
根据客户要求不同,价格也不一样,询价。