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公司简介
广州诺晶生物技术有限公司（Guangzhou KnoGen Biotech Co.,Ltd）成立于2016年，由多名长期从事生命科学研究的博士研究人员及海外留学人员联合创办，公司主要从事科研实验服务、生命医学技术开发、生物美学以及试剂盒产品的研发，致力于为科研院所、医院、企业的研究工作者、检测人员提供全方位的技术及产品支持，最大化节约工作时间、解放生产力。
公司的核心业务为微生物遗传改造（包括基因敲除、替换、启动子修改等），是国内唯一一家可以开展多种属细菌遗传改造的公司，技术水平国际领先。目前已经为国内数十家科研院所、医院、企业完成微生物遗传修饰委托服务。
诺晶生物虽然年轻，但具有前瞻的眼光，开拓进取的精神，不断瞄准市场空白，占领市场先机。公司拥有团结协作、朝气蓬勃、高学历的研究团队，完全可以为客户提供完美的实验及论文解决方案。诺晶生物真诚地期望与您合作，为您的工作及和成功贡献我们的力量。
实验技术服务
一、微生物遗传改造
- 基于细菌RecBCD系统的广泛同源重组（革兰氏阴性菌）
细菌基因遗传操作范围
G-细菌的非看家基因
本公司技术优势
（1）独特的供体菌，不要求靶细菌具有用于插入突变筛选的抗生素抗性。
（2）高效的供体菌接合系统，保证自杀质粒具有高的接合转移效率。
（3）自杀载体为T线性化载体，可直接与纯化PCR产物连接，不需要考虑酶切位点，大大节省客户时间。
（4）优化的自杀载体序列，最大化减少冗余区，从而提高接合转移效率，减少非特异重组的概率。
（5）自杀载体具有自主开发的反向筛选基因vmt，用于替换常规的sacB基因，从而大大增加基于自杀载体基因敲除技术的适用范围，大大减少第二次重组后缺失突变克隆的筛选工作。
(6) 具有一系列不同抗性的自杀质粒，保证具有某种抗性的靶细菌均有合适的自杀质粒使用。
- 金黄色葡萄球菌（G+细菌）遗传改造
自杀质粒经酶切后与目的基因融合片段连接，连接产物转化大肠杆菌中间宿主菌，获得携带外源片段的自杀载体。载体电转化工程金黄色葡萄球菌，使自杀载体得到特异的甲基化修饰，提高后继电转化靶细菌的成功率。甲基化修饰载体电转化到靶细菌。由于自杀载体不能在非工程化的金黄色葡萄球菌中复制，在抗生素选择压力下，只有细菌基因组靶位点整合有自杀载体的插入突变株才可以存活。在第二轮反向选择压力下，只有细菌基因组发生第二次同源重组并丢失自杀质粒的细菌才可以存活，在第二组同源重组后，子代细菌产生靶基因的缺失突变株和野生型菌株，通过PCR对平板上的克隆筛选，再经过测序验证，即可获得目的基因缺失突变（或其它遗传改造）。
- 一步法快速失活大肠杆菌基因
将携带有λ重组系统的质粒pKD46或pSIM5电转化入目标大肠杆菌中，获得可控表达重组系统的大肠杆菌株，再电转化入PCR产物，PCR产物二端为短的目的基因B两端序列相同的同源臂，中间为带有筛选标记的基因Y（通常为抗性基因）。PCR产物在pKD46或pSIM5表达的重组系统作用下，与基因X二端同源片段发生重组，目的基因B被Y替代，从而实现B基因的失活。
高温诱导下pKD46或pSIM5丢失，再次电转入pCP20质粒，诱导条件下表达FLP重组酶，基因Y两病的FRT位点发生重组，基因Y从染色体上切离，从而实现基因B的完全缺失。
优点：
简单快速，不需要耗时长的自杀载体构建过程。
一次导入表达重组系统的质粒后，可以重复使用，大量节约时间。
缺点：
在敲除位点，会留下约80多bp的scar，但不影响其它基因表达
服务价格及周期
根据菌种及敲除基因具体情况评估价格，量大优惠；实验周期2-3月，具体时间视菌株的特异性而定。
送样要求
- 菌株抗性测试（Ampicillin、Tetracycline、Kanamycin、Chloramphenicol），递交菌株前进行抗性测试，将节约您宝贵的时间。
- 准确的菌株种属信息及确切的待敲除或修饰基因序列及基因邻近上下游500bp左右的序列（序列信息标注见范例）
- 纯化、没有污染且鉴定正确的菌株
- 采用密封的离心管或冻存管或培养平板常温运送（顺丰快递）
- 本系统默认的培养基为LB培养基，培养温度为37℃，如有特殊要求，请来样时注明。
通过广州市海珠区工商行政管理局认证 
