动物基因组DNA提取

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单价: 490.00
品牌: SLNCO
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更新: 2021-07-01
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货号: PK901,902,903
数量: 大量
规格: 5T,50T,100T,200T
产品及特点:
       本产品在天泽基因动物DNAOUT(CAT#:3670)基础上改良而得的柱式升级产品,主要用于快速提取新鲜或冷冻的动物组织中的基因组DNA。跟动物DNAOUT相比,它具有下列特点:
1. DNA更加纯净,大多数DNA样品的OD260/280值在1.8-1.9之间。
2. DNA产率一般在200ug/g左右(跟组织种类密切相关)。
3. 可直接用于PCR、酶切、杂交等后续反应。
4. 操作更加简单,离心吸附操作代替离心沉淀,整个过程室温操作约10分钟,适合大规模样品处理。
5. 安全无毒,本试剂盒对人体无毒,无腐蚀性和刺激性气味。
6. 性价比高,质量和国外同类产品相当,但价格更便宜。
规格及成分
成份
50次包装(71206-50)
溶液A
50 mL
溶液B
50 mL
离心吸附柱
50 套
通用洗柱液
50 mL
通用洗脱液
5 mL
使用手册
1份
运输及保存
常温运输、4℃保存、有效期一年。
自备试剂
氯仿(也可省略,但产量会降低)
使用方法
1. 溶液A和溶液B在放置在4℃放置可能会产生沉淀,用前需要在65℃水浴中加热直到沉淀全部溶解,用前还需要充分摇匀。
2. 根据使用材料的不同进行下列操作:
a) 对贴壁细胞:吸尽培养液,在每10平方厘米细胞中加入1 mL溶液A,用枪充分吹打以确保细胞全部裂解。
b) 对悬浮细胞:离心收集细胞,吸尽液体,在每1-5×106悬浮细胞中加入1 mL溶液A,用枪充分吹打以确保细胞全部裂解。如果是fibroblasts或carcinoma cell,1 mL溶液A的细胞使用量不要超过1×106个细胞。
c) 对新鲜或冷冻的组织:先将剪切成小块的新鲜组织或冷冻保存的组织放入10 mL或15 mL塑料离心管中,每50-100 mg组织加1 mL溶液A,用匀浆器匀浆30秒左右。对肝、脾、胰、肾等细胞分裂十分旺盛的组织(细胞中含大量正在复制的DNA),建议组织的使用量不要超过50
mg/ mL溶液A。
d) 对DNALOCKER保存组织:先用纸吸去DNALOCKER液体后再剪切成小块,其余操作同新鲜或冷冻组织的处理。
3. 小心将裂解物转移至一个干净的1.5 mL塑料离心管中。
4. 12,000 rpm室温离心3-5分钟。
5. 小心将上清液转移到一新的离心管中。
注意:下面第6-8步的氯仿抽提操作可以省略,直接进入第9步,但DNA的产量会低30%左右,OD260/280不受影响。
6. 加入0.2倍体积的自备氯仿,振荡器上充分振荡混均30秒。
7. 12,000 rpm室温离心3-5分钟。
8. 小心将不超过0.75 mL的上清液转移到一新的离心管中。
9. 加入等体积的溶液B,充分混匀。
10. 分两次上柱(即先转移一半的混合液到离心吸附柱中,12,000 rpm室温离心半分钟,弃穿透液,然后再将剩下的混合液到离心吸附柱中,12,000 rpm室温离心半分钟,弃穿透液)。
11. 加0.7 mL通用洗柱液到离心吸附柱中,12,000 rpm室温离心半分钟,弃穿透液。
12. 加0.3 mL通用洗柱液到离心吸附柱中,12,000 rpm室温离心半分钟,弃穿透液。
13. 12,000 rpm室温再离心半分钟。此步十分重要,否则残留的通用洗柱液会污染DNA。
14. 将离心吸附柱转移到一新的1.5 mL塑料离心管中,加入50-100 uL 通用洗脱液。
15. 室温放置离心吸附柱1-2分钟。
16. 12,000 rpm室温离心半分钟,离心管中溶液即为DNA样品,可以立即使用或存放于冰箱待用。
关联产品
动物DNAOUT(CAT#:3670)
 
温馨提示:不可用于临床治疗。