PCR定点突变和RACE技术服务

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更新: 2021-05-30
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PCR定点突变和基因定点突变                                                 
PCR定点突变是指利用重叠延伸PCR方法在目的基因中引入单个或多个碱基的突变,包括碱基的添加,删除,替换等。从而对改变的目的蛋白进行形状和表型的研究。
长片段基因定点突变是指利用一对完全互补的突变引物,以克隆在载体上的基因为模板,在高保真Pfu酶作用下完成对载体的突变,再利用DpnI酶特异性酶解未发生突变的原始单链。将消化后的单链载体转化到感受态细胞中,利用载体菌的自身互补系统将另一条链进行互补,最终形成完整的含有突变位点的载体。
一、服务内容
1. 基因编码区,非编码区的单位点和多位点突变;
2. 大片段基因的单位点和多位点突变;
3. 含高GC含量和重复序列基因或大片段的单位点和多位点突变。
二、收费标准
服务项目 内容说明 收费标准¥ 实验周期
PCR定量突变 <1500 bp 3000/样品 2-3 周
长片段基因定点突变 1500 bp~6 kb 5000/样品
长片段基因定点突变 6 kp~10 kb 7000/样品 3-4周
长片段基因定点突变 10 kp~15 kb 请询价 3-4周
高GC含量基因和片段点突变 <3 kb (>3 kb) 6000/样品(请询价) 3-4周
重复序列片段点突变 <3 kb (>3 kb) 6000/样品(请询价) 3-4周
三、样品要求
1. 请提供待突变的质粒(> 1μg)或相应菌液;
2. 待突变的野生型基因或片段测序图谱一份;
3. 待突变位点的具体单位点和多位点要求;
4. 若无野生型的质粒或模板,也可提供基因组DNA(> 1μg)RNA,由我们完成野生型基因或片段的构建,具体收费标准和实验周期请参考载体构建相关内容。
三、终产品
1. 完整实验报告
2. 突变完成的质粒和甘油菌株
3. 完整测序报告和序列碱基图
 
 
◆载体改造
载体改造是指利用重叠延伸PCR、酶切等方法对己有载体多克隆位点(MCS) 序列、启动子、增强子、筛选标记、荧光标记等功能元件进行改造,从而增强载体的表达能力或形成具有新功能的载体。
一、服务内容
1. 提供改构成功的载体及甘油菌,提供改构后载体的测序报告;
2. 若改构位点特殊或较复杂,本公司技术部将免费为客户设计改构方案;
3. 各类载体改造,如细菌表达载体、酵母表达载体、杆状病毒表达载体、哺乳动物表达载体、报告基因载体等;
4. 若改构位点特殊或较复杂,本公司技术部将免费为客户设计改构方案。
二、收费标准
服务项目 内容说明 收费标准¥ 实验周期
载体改造 根据客户具体要求进行改造 请询价 4-8 周
三、样品要求
1. 请提供待突变的质粒(> 1μg)或相应菌液;
2. 载体构建及改造所需的实验方案(包括序列资料、希望克隆到的载体、酶切位点等资料),目的基因产物及序列,待改造载体及相关背景资料。
3. 待突变的野生型基因或片段测序图谱一份;
4. 若无野生型的质粒或模板,也可提供基因组DNA(> 1μg)RNA,由我们完成野生型基因或片段的构建,具体收费标准和实验周期请参考载体构建相关内容;
5.对于本公司已有的载体和模版,免费提供。
 
三、终产品
1. 完整实验报告(包括引物序列、载体图谱一份、测序结果等)
2. 含目的片段的质粒和含该质粒的甘油菌株
3. 完整测序报告和序列碱基图
 
 
35RACE (rapid-amplification of cDNA ends)
RACE是基于PCR技术基础上由已知的一段cDNA片段,通过往两端延伸扩增从而获得完整的3'端和5'端的方法。
 
一、服务内容
1. 3’和5’RACE特异性引物的设计;
2. 样品RNA的提取;
3. 序列未知基因3’和5’端片段的扩增;
4. 扩增片段的测序和比对;
5. 完整基因序列的拼接。
二、收费标准
服务项目 收费标准¥ 实验周期
3’RACE 4500/样品 2周
5’RACE 5500/样品 3周
3’和5’RACE 8000/样品 3-4周
三、样品要求
1. 待核酸提取的样品(包括细胞,组织,植物等)
2. 核心片段序列信息和预估计的基因长度,GC含量等相关信息;
四、终产品
1. 完整实验报告 (包括具体实验步骤和实验图片等)
2. 完整基因序列的质粒和克隆载体甘油菌株
3. 完整测序报告和序列碱基图