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CRISPR/Cas9（Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats）最新出现的一种由RNA指导Cas核酸酶对靶向基因进行特定DNA修饰的技术。CRISPR是细菌和古细菌为应对病毒和质粒不断攻击而演化来的获得性免疫防御机制。在这一系统中，crRNA（CRISPR-derived RNA）通过碱基配对与tracrRNA（trans-activating RNA）结合形成双链RNA，此tracrRNA/crRNA二元复合体指导Cas9蛋白在crRNA引导序列靶定位点剪切双链DNA达到对基因组DNA进行修饰的目的。CRISPR/Cas9系统能够对小鼠和大鼠基因组特定基因位点进行精确编辑， 目前已经成功应用于大、小鼠基因KO/KI的模型制备。
二、CRISPR/Cas9 技术特点：
1、可实现对靶基因多个位点或多个基因同时敲除；
2、实验周期短，价格低；
3、可应用于大、小鼠等，无物种限制。
三、制备流程及服务周期：
备注： 可以直接注射DNA
四、CRISPR/Cas9流程图：
五、海科 利用CRISPR/Cas9技术成功构建 Rosa26 KO mice 案例：
野生型：GGCTTCTGAGGACCGCCCTGGGCCTGGGAGAATCCCTTCCCCCTCTTCCCTCG
突变型 1：GGCTTCTGAGGACCGCCCTGGG---------ATCCCTTCCTCCTCTTCCCTCG
突变型 2：GGCTTCTGAGGACCGCCCTGG------AAGAATCCCTTCCTCCTCTTCCCTCG
结果说明：
突变型1: 缺失9bp；
突变型2: 缺失6 bp，替换1 bp。
