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| 货号： | JLE001L |
| 保存条件： | -20℃ |
| 英文名： | M-MLV reverse transcriptase |
| 保质期： | 1年 |
| 供应商： | 佳兰生物 |
| 数量： | 大量 |
| 规格： | 10000U |
产品说明：逆转录酶能以RNA或单链DNA为模板起始合成互补的DNA链。MMLV Reverse Transcriptase (RNase H-)是M-MLV逆转录酶的突变型，点突变去除了RNase H的活性中心，使RNase H的活性降低，减少了逆转录反应中RNA的降解，使cDNA第一链的得率增加，更容易获得全长cDNA。
来源：E.coli 菌株，含有突变型莫洛尼氏鼠白血病病毒（M-MLV）逆转录酶基因。
产品应用：第一链cDNA的合成；RT-PCR反应。
产品纯度： 200U的本酶和1μg的16S、23S rRNA在37℃下孵育1h，电泳条带无肉眼可见的变化。
推荐的反应条件：
cDNA第一链的合成
1) 在无RNase的PCR管中加入：Oligo dT12-18 (1μg/μl)或随机引物(50-250ng)1μl；Total RNA (10ng-5μg)或mRNA(1-500ng)xμl；dNTP (10mM each)1μl；DEPC ddOH2 (14-x)μl。
2) 70℃保温10分钟后迅速冰浴2-10分钟。
3) 离心数秒使反应液聚集于PCR管底部。
4) 向上述反应液中加入：5×RT Buffer 4μl；RNasin (40U/μl) 1μl；轻轻吸打混匀。
5) 42℃保温2分钟（Oligo dT12-18或基因特异引物）；如果是随机引物则25℃保温10分钟。
6) 加入1μl MMLV逆转录酶，混匀后42℃保温50分钟。
7) 70℃ 保温15分钟后置冰上冷却，得到cDNA。该产物可直接用于第二链的合成或RT- PCR扩增反应，保存请置于-20℃。
温馨提示：不可用于临床治疗。
通过房山分局认证 
