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| 货号： | IPE-GST |
| 数量： | 大量 |
| 规格： | 0.1mg |
琼脂糖亲和介质（谷胱甘肽）产品说明书
1. 产品简介
琼脂糖亲和介质（谷胱甘肽）是专门设计用于分离纯化不同来源（如胎盘、肝脏、胞液、大片吸虫、昆虫、血吸虫、玉米螟等）的谷胱甘肽S-转移酶、谷胱甘肽S-转移酶的重组融合蛋白和依赖S-转移酶或谷胱甘肽的蛋白，一步分离即可得到高纯度的目标蛋白，操作条件温和，有利于保持蛋白活性。
本中心开发的谷胱甘肽亲和介质以琼脂糖凝胶为基质，以谷胱甘肽为配基，具有良好的色谱性能，并具有较强的化学和物理稳定性。
2. 产品特性
| 参数 | 指标 |
| 基质 | 4%交联琼脂糖凝胶 |
| 配基 | 谷胱甘肽 |
| 形状 | 球形 |
| 介质平均粒径 | 90 μm (45~165) |
| 配基密度 | 20~30 GSH/ml wet gel |
| 动态载量 | 10mg GST/ml wet gel |
| 最高流速（25℃） | 450 cm/h |
| 最高耐压 | 0.3 MPa (3 bar) |
| pH稳定性 | 3~12（长时间）；2~12（短时间） |
| 化学稳定性 | 30%异丙醇、6M盐酸胍、8M尿素 |
| 物理稳定性 | 溶液的pH或离子强度影响介质的体积变化率<2% |
| 保存 | 4~8 oC（20%乙醇） |
3. 应用
谷胱甘肽亲和介质的层析操作通常包括装柱、平衡、进料、淋洗、洗脱、再生等步骤。
平衡：用5~10CV的平衡缓冲液（50 mM Tris-HCl，pH8.0，可添加适当浓度（如0.15M）的NaCl抑制非特异性吸附）平衡层析柱，至流出液电导和pH不变（与平衡液一致）。
进料：样品缓冲液应尽可能与平衡液一致。固体样品可用平衡液溶解配制；低浓度样品溶液可用平衡液透析；高浓度样品溶液可用平衡液稀释。为了避免堵塞层析柱，样品应经离心或微滤（0.45μm）处理。进料量根据介质的载量和料液中目标蛋白的含量计算。
淋洗：上样完毕后继续用平衡缓冲液淋洗至基线。
洗脱：用洗脱缓冲液（50 mM Tris-HCl+10mM GSH，pH8.0，GSH浓度需要根据目标蛋白的结合力进行适当调整）洗脱，收集流出液。
原位清洗：介质使用数次（具体次数与原料的种类和来源及实验要求有关）后，需要对介质进行在位清洗。
（1）最常用的方法是用0.5M的NaOH以100cm/h的速度淋洗柱子3-5CV，然后用缓冲液洗到中性即可重复使用；
（2）对疏水性结合的蛋白、脂蛋白和脂类物质，可用5~10 CV的70%乙醇或30%异丙醇清洗（20 min以上），并用3~10 CV的纯水冲洗。
其它注意事项：在装柱、使用和保存柱子的时候，要避免柱子流干而导致气泡进入。
