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| 货号： | IPE-heparin |
| 数量： | 大量 |
| 供应商： | 国家生化工程技术研究中心 |
| 规格： | 0.1mg |
琼脂糖亲和介质（肝素）产品说明书
1. 产品简介
肝素（Heparin）是一种含硫酸酯的酸性多糖，能和抗凝血因子III、凝血酶、类凝血酶、人凝血因子IX、XI和VIII，也能和大肠杆菌表达的人白介素、人前列腺生长因子、重组人血管内皮生长因子、软骨生长因子、碱性成纤维细胞生长因子、重组人酸性成纤维细胞生长因子、重组肝细胞生长因子、重组鼠肝素辅因子II、重组人血小板第四因子、重组人内皮抑素、重组人角质细胞生长因子等生物大分子结合，所以肝素亲和介质可以用于这类物质的纯化。
本中心开发的琼脂糖亲和介质（肝素）以交联琼脂糖为基质，将肝素偶联到琼脂糖凝胶上，该介质具有良好的色谱性能，并具有较强的的物理化学稳定性，配基不易脱落，使用寿命长，使用方便。
2. 产品特性
| 参数 | 指标 |
| 基质 | 6%交联琼脂糖凝胶 |
| 配基 | Heparin |
| 形状 | 球形 |
| 介质平均粒径 | 90 μm (45~165) |
| 配基密度 | 5mg heparin/ml wet gel |
| 动态载量 | 2mg AT III/ml wet gel |
| 最高流速（25℃） | 500 cm/h |
| 最高耐压 | 0.3 MPa (3 bar) |
| pH稳定性 | 4~12（长时间）；4~13（短时间） |
| 保存 | 4~8 oC（0.05M乙酸钠+20%乙醇） |
3. 应用
肝素亲和介质的层析操作通常包括装柱、平衡、进料、淋洗、洗脱、再生等步骤。
平衡：用5~10CV的平衡缓冲液（20-50mM PB或Tris/HCl，pH 7.4-8.0，可加入0.15M NaCl抑制非特异吸附）平衡层析柱，至流出液电导和pH不变（与平衡液一致）。
进料：样品缓冲液应尽可能与平衡液一致。固体样品可用平衡液溶解配制；低浓度样品溶液可用平衡液透析；高浓度样品溶液可用平衡液稀释。为了避免堵塞层析柱，样品应经离心或微滤处理。进料量根据介质的载量和料液中目标蛋白的含量计算。
淋洗：上样完毕后继续用平衡缓冲液淋洗至基线。
洗脱：用洗脱缓冲液（20-50mM PB或Tris/HCl+1-2M NaCl，pH 7.4-8.0，NaCl浓度需要根据目标蛋白的结合力进行适当调整）洗脱，收集流出液。可采用线性梯度或阶越式梯度洗脱。
原位清洗：为了避免不同样品间的相互干扰，或者当介质污染比较严重时（反压增加），需要对介质进行在位清洗。
（1）对于以离子键结合的蛋白，可用2~3 CV以上的2M NaCl清洗，并用3 CV以上的纯水冲洗。
（2）对沉淀或变性蛋白蛋白，可用0.1M NaOH清洗（1~2h），并用3~10 CV平衡液和3 CV以上的纯水冲洗。也可用6M Gua-HCl或8M urea清洗（0.5~1h）
（3）对疏水性结合的蛋白，可用0.1~0.5%的非离子去污剂清洗（1~2h），并用3~10 CV的纯水冲洗。
