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份 库存999份
| 货号： | ZDK-010Z |
| 保存条件： | 2-8℃ |
| 保质期： | 1年 |
| 数量： | 大量 |
| 规格： | 100T |
产品编号：ZDK-010Z 规格：100T
该产品由军事医学科学院研发监制
一、原理
GSHpx活力以单位时间内催化GSH氧化减少的量来表示，GSH和DTNB反应可生成黄色的阴离子，测定该离子的浓度，既可计算出GSH减少的量。由于GSH能进行非酶反应氧化，所以最后计算此酶的活力时，必须扣除非酶反应引起的GSH减少。
二、检测范围
组织、细胞、血清、血浆
三、试剂组成
A. 叠氮钠磷酸缓冲液 40ml
B. 偏磷酸沉淀液贮存液 200ml
C. Na2HPO4溶液 150ml
D. GSH 9.21mg
E. 30% H2O2 0.5ml
F. 柠檬酸三钠溶液 30ml
G. DTNB 10mg
三、试剂配制
A. 1.0mM GSH溶液:使用当日按需要量用叠氮钠磷酸缓冲液配制。取GSH3.07mg, 加叠氮钠磷酸缓冲液10ml，为1.0mM GSH溶液。
B. 1.5mMH2O2溶液: 使用当日按需要量用30% H2O2 用双蒸水配制。取30% H2O2 15µl，双蒸水定容至100ml（自制）。
C. 0.4mg/ml DTNB显色液：按需要量用柠檬酸三钠溶液配制，4℃冰箱内可保存一月。DNTB 10mg ,加入25ml柠檬酸三钠溶液为0.4mg/ml DTNB显色液。
四、GSH标准曲线的制作
配制标夜
GSH(µm) 0 20 40 60 80 100
1.0mMGSH (ml) 0 0.05 0.1 0.15 0.2 0.25
偏磷酸沉淀液 (ml) 2.0 2.0 2.0 2.0 2.0 2.0
双蒸水 (ml) 0.5 0.45 0.4 0.35 0.3 0.25
取上述标液0.4ml,加入Na2HPO4溶液0.5ml，再加入DTNB 0.1ml，混匀。于5min内用412nm比色，以双蒸水调零。
五、测定步骤
取样品液（如：人血20µl或鼠血10µl）10ul或20ul，双蒸水稀释至1.0ml，4小时内测定活力。
（注：血浆、血清直接作为样品液操作本步骤，组织需要10%匀浆后10000转/份离心20分钟后去上清。）
1. 测定步骤
样品管 非酶管 空白管
1.0mM GSH 0.2 ml 0.2 ml /
血样 0.2 ml / /
双蒸水 / 0.2 ml /
37℃水浴5min
H2O2(37℃预热) 0.1 ml 0.1 ml /
37℃准确反应5min(人血)或3min（鼠血）
偏磷酸沉淀液 2.0 ml 2.0 ml /
3000rpm离心10min
取上清夜 1.0 ml 1.0 ml /
双蒸水 / / 0.2 ml
偏磷酸沉淀液 / / 0.8 ml
Na2HPO4溶液 1.25 ml 1.25 ml 1.25ml
DTNB显色液 0.25 ml 0.25 ml 0.25ml
反应1min后，412nm比色，读取OD值。依据标准曲线计算浓度。
六、保存
于2-8℃保存1年。
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