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GST-resin 使用说明书

一、简介：

GST-resin 纯化柱系采用进口填料分装而成，性质稳定，重复性好，使用简单、方便。胶粒平均直径60微米，比表面积大，结合大肠杆菌重组GST蛋白的能力大于8 mg/ml。可以满足大多数实验室级别小量纯化GST融合蛋白的需求。

二、使用方法：

1. 离心收集250 ml表达目标蛋白的大肠杆菌，冻融或超声破菌于10-15 ml破菌缓冲液。破菌缓冲液: 20-50 mM Tris-HCl，pH 7.5-8.5，含0.25 M NaCl，其它常用缓冲液为PBS。这一步可以适当加入EDTA，PMSF等蛋白酶抑制剂。

2. 离心取上清，上样于预先平衡好的纯化柱，通常自然流速可以很好结合。少数情况下，流速过慢，可以使用硅胶管控制上样速度。

3. 样品上完以后，使用破菌缓冲液洗柱10-20个柱体积，注意将纯化柱侧壁上的残留样品洗干净。

4. 使用2-4 ml洗脱缓冲液将样品从GST-resin纯化柱上洗脱。洗脱缓冲液：破菌缓冲液中补加新配制还原型谷胱甘肽（GSH）到终浓度6 mM，10 mg GSH干粉可配制5 ml洗脱缓冲液。

5. 纯化结束以后，使用20倍柱体积1% 醋酸冲洗纯化柱，再使用PBS/TBS平衡pH，大量纯水洗柱，最后加入5 ml 20%乙醇，保存在4 ℃，不要在-20 ℃冻结，仔细保存可以让一根柱子反复使用。

温馨提示：不可用于临床治疗。

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