Protein A/G-Plus Beads抗体纯化柱_抗体制备_免疫学服务_技术服务库_商城

货号：	Lot#YK-2009-33
数量：	大量
抗原来源：	ot
适应物种：	,
应用范围：	,
宿主：	ot
是否单克隆：	否
规格：	100ug

Protein A/G-Plus Beads抗体纯化柱使用说明

【产品说明】

本产品使用Protein A与Protein G的抗体结合结构域融合后的重组蛋白和4％浓度的琼脂糖树脂偶联制成。由于采用了重组表达的Protein A/G，并去除了其白蛋白结合区，该基质能够特异性地结合多种免疫球蛋白的Fc区段，作为亲和树脂，可用来纯化不同来源的抗体和抗体亚型，以及在免疫共沉实验中捕获免疫复合物。本产品使用了多位点交联技术，稳定性好、特异性高并具有广谱结合力，每ml基质可特异性结合6-10 毫克抗体。

【产品组分】

50％ Protein A/G Agarose悬液，PBS，20％乙醇

【储存条件】

4℃保存，有效期一年；常温（15~25℃）运输；切勿冻结！

【抗体纯化】

1) 取适量Protein A/G Agarose悬液，装入层析柱，用10倍柱体积的PBS（或者TBS，下同）洗涤平衡层析柱。

2) 含抗体的血清或其它体液高速离心后，将上清与等体积2×PBS缓冲液混合，调整pH以及离子浓度后，缓慢加入层析柱。

3) 用10倍柱体积以上的PBS洗涤，至流出液无蛋白检出。

4) 加入2倍柱体积0.1 M 柠檬酸（Citrate Acid, pH 2.7），夹住流出管，静置5分钟后收集穿出液，重复三次。测定OD₂₈₀估算抗体浓度，如果所得抗体较多可以使用SDS-PAGE检测纯度。也可以选择0.1 M甘氨酸（Glycine, pH 3.0）洗脱。

5) 洗脱后的抗体加入2/5体积的1 M Tris，pH 8.0中和，使用Millipore蛋白浓缩管切换到所需缓冲液，通常为2×PBS含有0.02% NaN₃以及1 mM EDTA。

6) 浓缩到所需体积，加入50%甘油；测定效价后，分装并保存在-20℃，避免冻结。

温馨提示：不可用于临床治疗。