基因克隆及载体构建

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更新: 2021-05-24
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提供商: 云南临康生物
服务名称: 基因克隆及载体构建服务
    分子克隆是在分子水平上提供一种纯化和扩增特定DNA片段的方法。常含有目的基因,用体外重组方法将它们插入克隆载体,形成重组克隆载体,通过转化与转导的方式,引入适合的寄主体内得到复制与扩增,然后再从筛选的寄主细胞内分离提纯所需的克隆载体,可以得到插入DNA的许多拷贝,从而获得目的基因的扩增。

    DNA片段的克隆需要合适的载体,质粒、噬菌体和病毒均可作为载体,通常大多经过人工改造。作为载体,必须具备两个条件:一是该载体在细胞内必须能够进行自我复制,即必须具备复制原点;二是该载体必须具备适合的酶切位点,且这些酶切位点不在复制原点区域内。以上两点,保证了载体的可繁殖性和可利用性。为了便于获得阳性克隆子,载体上通常有筛选标记,如对抗菌素的抗性,某些基因产物的显色反应的等。
 
服务流程:

 1、表达系统选择及方案设计:
    ①根据客户所需的要求,推荐最适合的表达系统(大肠杆菌/酵母/昆虫细胞/哺乳动物细胞表达系统);
    ②根据客户选择的表达系统,推荐密码子优化方案;
    ③设计最佳的表达载体构建(是否融合表达、是否添加Tag等)及相应的蛋白纯化方案 。
 2、获取目的基因DNA序列 
 3、表达载体构建 
 
服务说明:

 1、客户提供:样本DNA,基因序列,试剂盒(也可由我公司代购);
 2、公司提供:①相关的实验说明和相关的酶切图片;②测序的结果;③构建好的载体和菌液各一份;④如有鉴定的客户提供PCR鉴定图片。
 3、服务周期:详询