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| 货号： | Proteinase K |
| 供应商： | 祥生兴业 |
| 保存条件： | -20℃ |
| 规格： | 100mg |
蛋白酶K是一种枯草蛋白酶类的高活性蛋白酶，从布氏白僵菌（Beauveria bassiana）中纯化得到，用于生物样品中蛋白质的一般降解。该酶有两个ca2+结合位点，它们离酶的活性中心有一定距离，与催化机理并无直接关系。然而，如果从该酶中除去ca2+，由于出现远程的结构变化，催化活性将丧失80%左右，但其剩余活性通常已足以降解在一般情况下污染酸制品的蛋白质。蛋白酶K是一种切割活性较广的丝氨酸蛋白酶。它切割脂族氨基酸和芳香族氨基酸的羧基端肽键。在较广的pH范围内（pH 4-12.5）均有活性，在尿素和SDS中也较为稳定，还具有降解天然蛋白质的能力。
规格：100mg/瓶 或客户定制
比活性值：38 U/mg蛋白
来源种属：酵母菌
分子质量：28,650
纯 度 : ≧99.2%
二、产品检测报告
1、稀释缓冲液
根据需要，利用20mM Tris-HCL 缓冲液（PH 7.5）溶解成20mg/ml的工作浓度。
| 活性单位定义 | 37℃、PH7.5条件下，每分钟可水解底物酪蛋白生成1μmol酪氨酸所需蛋白酶K的量，定义为一个单位。 |
| 脱氧核糖核酸酶残留 | 以λDNA为底物，37℃消化4小时以上，未检测到脱氧核糖核酸酶活性。 |
| 核糖核酸酶残留 | 37℃消化12小时以上，未检测到核糖核酸酶活性。 |
3、酶纯度测定（SDS—PAGE）
结果：蛋白酶K纯度超过99.2%。
4、酶活性测定
| 蛋白酶K比活性值 | ||
| 产品来源 | 本产品 | Sigma |
| 比活性值（U/mg） | 38 | >30 |
5、酶稳定性测定（—20℃冷冻条件下，12个月的数据）
结果：干粉状态正确储存，一年内酶活性保持不变；溶解状态酶活性一年内降低小于2%。
6、酶质检结果
| 序号 | 检验项目 | 检验标准 | 是否合格（合格√） |
| 1 | 动物基因组提取（蛋白酶K浓度为20mg/ml） | 不影响动物基因组的有效提取 | √ |
| 与不加蛋白酶K的样品相比，能有效降解蛋白质 | √ | ||
| 2 | 降解蛋白质能力 | 与15ug BSA 37℃孵育1小时，BSA可有效降解 | √ |
| 质检结论：合格（√） 让步放行（ ） 需要复检（ ） 不合格（ ） | |||
三、抑制剂
蛋白酶K是一种丝氨酸蛋白酶，因此可以用Phenylmethylsulfonyl fluoride抑制其作用，Phenylmethylsulfonyl fluoride是一种丝氨酸蛋白酶的抑制剂。在纯化蛋白质时用于防止蛋白质的降解。
四、应用范围
蛋白酶K的用途广泛，主要的应用行业包括：医疗及基础研究领域：基因诊断试剂盒；基因组DNA提取试剂盒、RNA提取试剂盒中去除DNA和RNA制备中的核酸酶；此外，还应用于：皮革工业（皮革软化及精细化、脱毛和软化、蚕丝脱胶）制备脉冲电泳的染色体DNA；提取组织中非蛋白成分时，降解含有蛋白质杂质；食品、酿造工业：肉类嫩化、酒类澄清；洗涤工业：酶洗衣粉、洗衣液等也有应用。
五、贮存和使用
干粉条件下有效期为24个月，液态时-20℃保存12个月。客户利用缓冲液溶解后，需要-20℃贮存。溶解后，最好分装成若干份，方便使用，避免反复冻溶。如果需要在2-8℃环境下放置，超过三天，建议过滤除菌或加入抑菌剂如3%叠氮化钠，防止微生物污染。
孵育温度为55至65℃，理想孵育温度为58℃，孵育时间为15分钟至48小时；理想孵育时间为2小时。
六、产品优势
蛋白酶K，是一种来源于新发现的真菌蛋白酶K基因，经优化后异源重组表达得到的切割活性较广的丝氨酸蛋白酶。它切割脂族氨基酸和芳香族氨基酸的羧基端肽键。此酶经纯化去除了RNA酶和DNA酶活性。由于该蛋白酶K在尿素和SDS中仍然具有降解天然蛋白质的能力，因而被广泛应用于制备脉冲电泳的染色体DNA、蛋白质印迹以及去除DNA和RNA制备中的核酸酶。
严格的对比实验研究表明，本公司产品蛋白酶K与现有市场上林伯氏白色念球菌来源的蛋白酶K产品相比，对大片段蛋白质的切割能力基本相同，而在小片段蛋白质的降解能力方面较其他产品活力高出50%以上。
温馨提示：不可用于临床治疗。
通过开发区分局认证 
