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份 库存999份
| 货号： | K06005V |
| 供应商： | 弘业新创抗体技术股份有限公司 |
| 数量： | 大量 |
| 英文名： | pBET-5 T Vector |
| 保质期： | 1年 |
| 保存条件： | -20℃ |
| 规格： | 20μl |
外源蛋白单独表达pBET-5 T Vector
产品说明
pBET-5载体是高效表达T载体，线性化载体3’-末端含有突出的碱基“T”，可以将3’-末端含有“A”的PCR扩增产物高效率的连接至pBET-5载体上。同时该载体含有完整的表达元件，如Lac启动子、RBS、转录终止子等。此外，在表达框内C-末端含有His6标签和c-myc标签序列，可以与外源基因融合表达，得到C-末端融合有His6和c-myc标签的蛋白，该融合蛋白可以用His6标签进行亲和纯化，还可以用抗c-myc标签的抗体进行检测。本试剂盒中含有的高效连接液Ligation Mixture可以方便的将载体和外源片段进行高效连接，反应产物可以直接用于转化。产品说明
保存条件
保存温度：-20℃使用方法
1. 在微量离心管中配制以下DNA溶液，全量为5μl。| pBET-5 | 1μl（70ng） |
| PCR片段 | 适量 |
| 水 | 补足至5µl |
2. 加入5μl的Ligation Mixture。
3. 4℃反应过夜或者16℃连接2小时至4小时。将10μl连接混合液加入100μl感受态细胞中，冰水浴放置30分钟。
4. 迅速置于42℃水浴热激2分钟，迅速在冰水浴放置2分钟。
5. 加入900μl 2YT（或LB）培养基，37℃，180rpm振荡培养45分钟。高速离心收集菌体，去掉800μl上清，留200μl重悬细胞。
6. 将200μl细胞重悬液涂布在含有相应抗生素的琼脂平板培养基上，37℃倒置培养过夜，形成单克隆。挑取单菌落，鉴定阳性克隆。
注意事项
1. 连接反应请在16℃以下进行，温度升高较难形成环状DNA。连接时间控制在4℃反应过夜或者16℃反应2小时至4小时。对于较难连接的反应，可以4℃过夜和16℃连接2小时交替连接。反应时间过短或者温度高较难筛选得到阳性克隆。2. 为提高克隆鉴定的效率，尽量减少假阳性，保证鉴定克隆为正向插入克隆，在用PCR方法进行阳性克隆鉴定时，应采用载体上游引物和扩增片段的下游引物进行鉴定或者采用载体下游引物和扩增片段的上游引物进行鉴定。
产品目录及报价
| 货号 | 产品名称 | 规格 | 报价(元) |
| K06005V | 外源蛋白单独表达pBET-5 T Vector | 20μl | 900 |
| K06005AS | 外源蛋白单独表达T载体试剂盒I | 5μl | 300 |
| K06005A | 外源蛋白单独表达T载体试剂盒I | 20μl | 1000 |
必拓生物（Bio-tool）品牌介绍
必拓生物(Bio-tool)是弘业新创抗体技术股份有限公司的生物试剂品牌。必拓生物(Bio-tool)紧密结合市场需求，专注于细胞培养与冻存、抗体检测与蛋白纯化、以及各类分子生物学试剂的研发与生产，目前已有近千种优质产品，应用于科研实验、体外诊断/检测试剂盒开发以及药物开发等领域，且产品品质获得广大用户的一致好评。
弘业新创抗体技术股份有限公司
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